PCR-SSCP技术是一种分子生物学分析方法，由日本Orita等于1989年创建，是筛查突变的新技术。这种技术结合了PCR（聚合酶链式反应）和SSCP（单链构象多态性）的原理。PCR技术是一种在引物参与下，由酶催化特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。它具有灵敏度高、简便、快速的特点，且对标本的纯度要求低。而SSCP技术...
在干净的 PCR 管底部加入 5ul SSCP 上样缓冲液(变性缓 冲液,同《分子克隆》中的测序缓冲液),然后在缓冲液中央加入 PCR 扩增产物。按照经验,扩 增效果在琼脂糖胶上能看出比较亮的带的样品加 1ul,效果很好加 0.5ul,如果不太好就适当增加 1.5、2 或 3 不等,同时加大上样缓冲液的量,比如加 3ul 的 PCR ...
单链构型多态性分析法(PCR-SSCP):将PCR产物双链DNA(dsDNA)变性为单链DNA(ssDNA),加样于变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,由于DNA分子在凝胶中的电泳迁移率与其分子量和空间结构有关,而空间结构又与ssDNA序列有关。因此,电泳结束后,ssDNA带位置的差异即可反映出PCR产物序列的差异,从而对DNA中的单个碱基的替代、微小缺失或...
P C R — S S C P 谢雪晴 PCR-SSCP(PolymeraseChainReaction-SingleStrand ConformationPolymerase,多聚酶链式反应-单链构象多肽) 分析法是一种DNA单链凝胶电泳技术; 它根据形成不同构象的等长DNA单链中中性聚丙烯酰胺凝 胶中电泳迁移率变化来检测基因变异。 PCR-SSCP 01 PCR-SSCP技术原理及特点 C 目录 内容 ...
PCR-SSCP技术是一种分子生物学分析方法,由日本Orita等于1989年创建,是筛查突变的新技术。这种技术结合了PCR(聚合酶链式反应)和SSCP(单链构象多态性)的原理。 PCR技术是一种在引物参与下,由酶催化特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。它具有灵敏度高、简便、快速的特点,且对标本的纯度要求低。
聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长度核苷酸的...
近几年来,在PCR基础上完善和发展起来的多种基因变异检测方法是基因分析和检测的一次技术革命。其中日本学者创建的PCR-SSCP(Single-Strand Conformation Polymorphism anal-ysis of PCR products)格外重要。它是指单链DNA分子在变性PAGE中电泳迁移率随其构象的改变而改变的性质。单链DNA分子的构象改变即可由DNA多态性引起...
单链构象多态性分析(PCR-SSCP) 服务项目简介 单链DNA段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用 力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会影响其空间构象,使构象发生改变。空间构象有差 异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中受排阻程度不同,因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电 泳(PAGE)...
聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR-SSCP)是近年来发展起来的一种基因分析方法。 PCR- SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将扩增产物变性为单链,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶...