SSCP是单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的缩写。其原理是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象,因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就是说在相同...
在干净的 PCR 管底部加入 5ul SSCP 上样缓冲液(变性缓 冲液,同《分子克隆》中的测序缓冲液),然后在缓冲液中央加入 PCR 扩增产物。按照经验,扩 增效果在琼脂糖胶上能看出比较亮的带的样品加 1ul,效果很好加 0.5ul,如果不太好就适当增加 1.5、2 或 3 不等,同时加大上样缓冲液的量,比如加 3ul 的 PCR ...
PCR仪上95变性5-10分钟,立即取出PCR产物连同架子一同置于冰上静置5min,以免变性的产物复性。 *注:3和4步可以在制SSCP胶第四步后,等胶凝的过程中进行。 二. 制胶 1. 装板。在所要进行实验的每一副玻璃板(事先洗静、风干)的两边及底部装上垫片,尽量使底边及侧边紧密接触,夹子固定好,用0.8-1%的琼脂糖封边...
PCR-SSCP实验简介 PCR-SSCP是由1989年在日本创建的一种用于筛选突变的新技术，它是一种简单，快速且经济的点突变筛选方法。PCR-SSCP技术的基本原理是将PCR扩增后的DNA片段变性为单链DNA，在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳单链DNA时，会形成不同的三维构象，其构象直接影响游泳速度，具有串联长度的DNA的单链的核苷酸序列的...
CR-SSCP法:是一种基于单项链DNA构象差别的快速、敏感、有效的检测基于点突变的DNA多态方法。其基本原理是对已知基因点突变的遗传病,在其突变位点附近设计引物进行PCR扩增,将扩增的产物取出一部分,在96%的甲酰胺中变性,然后在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶电泳中电泳,由于单链DNA中碱基对或聚集,当温度或变性剂等环...
1.PCR-SSCP的原理 PCR-SSCP于1989年首先报道,该方法的原理是基于序列不同的DNA单链片段,其空间构象亦有所不同,当其在非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳时,其泳的位置亦发生变化而表现出不同序列单链其电泳迁频率的差异,从而据引判断有无突变存在.对于一段DNA来说,其单链具有特定的空间构象,这种空间构象的形成与...
PCR-SSCP技术是一种分子生物学分析方法，由日本Orita等于1989年创建，是筛查突变的新技术。这种技术结合了PCR（聚合酶链式反应）和SSCP（单链构象多态性）的原理。PCR技术是一种在引物参与下，由酶催化特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。它具有灵敏度高、简便、快速的特点，且对标本的纯度要求低。而SSCP技术...
正确答案:聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长...
聚合酶链式反应及单链构象多态性(PCR-SSCP)技术作为一种区分检测基因组之间微小差异的有效方法 ,具有快速、简便、灵敏 … dict.cnki.net|基于18个网页 2. 单链构象多态性分析 用单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测TATA突变。结果:所有新生儿或TATA野生型新生儿中,G6PD缺乏组高胆发生率及其危 … ...