聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长度核苷酸的...
SSCP是单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的缩写。其原理是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象,因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就是说在相同...
1、原理 PCR-SSCP是1989年日本关谷实验室结合PCR反应和单链DNA非变性聚丙烯胺电泳首先创立的,其基本原理是:在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,DNA单链的迁移率除与DNA链的长短有关外,更主要的是取决于DNA单链所形成的构象。在非变性条件下,DNA单链可自身折叠形成具有一定空间结构的构象。这种构象由DNA单链...
PCR-SSCP是由1989年在日本创建的一种用于筛选突变的新技术，它是一种简单，快速且经济的点突变筛选方法。PCR-SSCP技术的基本原理是将PCR扩增后的DNA片段变性为单链DNA，在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳单链DNA时，会形成不同的三维构象，其构象直接影响游泳速度，具有串联长度的DNA的单链的核苷酸序列的至少一部分可以产生...
PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA，单链DNA在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时形成不同的立体构象，其构象直接影响泳动速率，相同长度的 DNA单链其核苷酸顺序仅有单个碱基的差别，就可以产生立体构象的不同，造成泳动速率的不同，产生不同的泳动带。工具/原料 设计好引物，需要使用的试剂 方法...
PCR-SSCP 相关知识点: 试题来源: 解析 PCR-单链构象多态性,用于检测点突变的技术。其原理是根据单链DNA分子能自发地形成二级结构,且二级结构的空间构象取决于DNA分子本身的碱基组成,一个碱基的差别即可导致所形成的二级结构改变。 根据单链DNA分子能自发地形成二级结构,且二级结构的空间构象取决于DNA分子本身的碱基...
CR-SSCP法:是一种基于单项链DNA构象差别的快速、敏感、有效的检测基于点突变的DNA多态方法。其基本原理是对已知基因点突变的遗传病,在其突变位点附近设计引物进行PCR扩增,将扩增的产物取出一部分,在96%的甲酰胺中变性,然后在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶电泳中电泳,由于单链DNA中碱基对或聚集,当温度或变性剂等环...
技术原理 PCR-SSCP分析的基本步骤包括：PCR扩增：首先，使用特定的引物对目标DNA序列进行PCR扩增。单链构象制备：PCR产物在加热至95°C的条件下变性，使双链DNA解链为单链。单链DNA在较低温度（通常在50-65°C之间）下复性，此时其构象稳定。凝胶电泳分析：将复性的单链DNA加载到聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。由于单...