SSCP是单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的缩写。其原理是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象,因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就是说在相同...
简要叙述PCR-SSCP技术的原理。相关知识点: 试题来源: 解析 聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性...
PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA，单链DNA在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时形成不同的立体构象，其构象直接影响泳动速率，相同长度的 DNA单链其核苷酸顺序仅有单个碱基的差别，就可以产生立体构象的不同，造成泳动速率的不同，产生不同的泳动带。工具/原料 设计好引物，需要使用的试剂 方法...
1.了解PCR-SSCP技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 二、实验原理 SSCP(Single-Strand Conformation Polymorphism):单链构象多态性检测,是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的基于DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同...
四、SSCP的应用 自从Orita等用SSCP进行人类DNA多态性分析以来,该方法大量地用于检测和肿瘤发生 有关的基因突变,例如检测星形细胞瘤、脑瘤、小细胞肺癌、胃癌、肠癌等肿瘤中的 p53基因的突变、肺癌的ras基因突变等.最近Sugano等用银染色SSCP法,成功地检测 了c-Ki-ras2基因第12位的突变,电泳和银染色过程在2.5小时内...
PCR-SSCP(聚合酶链式反应-单链构象多态性)技术是通过PCR扩增特定DNA片段,利用单链DNA在非变性条件下的构象差异,通过凝胶电泳迁移率差异检测点突变或多态性的分子生物学技术。其应用包括基因突变检测(如遗传病、肿瘤相关基因)、微生物分型、法医学个体识别及生物多样性研究等。 1. **技术原理确认**:PCR-SSCP的核心...
(2)PCR-SSCP技术:是聚合酶链反应一单链构象多态性分析(single strand conformation polymorphism)的简称,原理是将经扩增的DNA片段经过变性处理,形成单链,由于序列不同,单链构象就有差异在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳的迁移率不同,通过与标准物的对比,即可检测出有无突变,该技术已广泛应用于检测各种病原体基因的点突变...
PCR-SSCP原理及应用 随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性片段长度多态性分析(Restriction Fragment Length PolymorPhism,RFLP)...
PCR-RFLP的基本原理是用PCR扩增目的DNA,扩增产物再用特异性内切酶消化切割成不同大小片段,直接在凝胶电泳上分辨。不同等位基因的限制性酶切位点分布不同,产生不同长度的DNA片段条带。 PCR-SSCP是当某段DNA上有单个碱基对突变时(多见于遗传性疾病),先做PCR扩增该区域。然后在非变性的情况下跑胶。由于碱基对的...
技术原理 PCR-SSCP分析的基本步骤包括：PCR扩增：首先，使用特定的引物对目标DNA序列进行PCR扩增。单链构象制备：PCR产物在加热至95°C的条件下变性，使双链DNA解链为单链。单链DNA在较低温度（通常在50-65°C之间）下复性，此时其构象稳定。凝胶电泳分析：将复性的单链DNA加载到聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。由于单...