PCRSSCP检测PCR SSCP是对未知单核苷酸多态性 (SNPs)进行检测最简便、最实用的方法之一 .该方法检测的灵敏度易受片段大小的影响 .以大小在 2 0 0bp左右的PCR扩增产物为检测对象 ,对该方法的影响因素进行了分析 .结果表明 ,在 4℃条件下 ,10V cm恒压电泳 10～ 16h ,在上样缓冲液中加入10 %甘油 ,在 12 ...
（1）提取样本的TotalDNA （2）酶切 （3）电泳---胶处理 （4）转膜 （5）杂交 （6）放射自显影 （7）结果分析SSCP基本过程：①PCR扩增靶DNA；②将特异的PCR扩增产物变性，而后快速复性，使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子；③将适量的单链DNA进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；④最后通过放射性自...
【摘要】PCR-SSCP是一种以PCR为基础的单链构象多态性分析技术,是DNA已知突变的检测或未知变异分析中常用和实用的技术之一.影响SSCP试验效果的因素有很多,本研究主要对凝胶浓度和是否添加甘油两个因素进行分析与探讨.结果表明,凝胶浓度12%和添加甘油终浓度10%的条件下可以得到满意的结果. 【期刊名称】《生物技术通报》...
分析结果.若发现单链DNA带迁移率与正常对照的相比发生改变,就可以判定该链构象发生改变,进而推断该DNA片段中有碱基突变.该方法简便、快速、灵敏,不需要特殊的仪器,适合临床实验的需要.但它也有不足之处.例如,只能作为一种突变检测方法,要最后确定突变的位置和类型,还需进一步测序;电泳条件要求较严格;另外,由于SSCP是...
基因突变PCR-SSCP目的:探讨抑癌基因P^53突变与宫颈癌发生发展之间的关系,并为该病的临床检测提供一种分子生物学方法.方法:应用多聚酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法对宫颈癌及慢性宫颈炎组织中P^53基因5~6外显子的突变进行了检测.结果:35例宫颈癌组织中有2例出现突变,突变率为5.71$,而作为对照的...
结果:PCR-SSCP分析发现患者8的20、39和46外显子,以及患者90的26外显子的PCR产物单链DNA迁移率异常,亦发现患者8之母存在与其相同的异常迁移带以及正常迁移带。DNA测序证实患者8的COL4A5基因第20外显子1157和1158位缺失CC两个碱基,而第39及46 外显子为同义突变;患者90第26外显子2171位缺失一个C碱基。这两位...
为了研究中国人Wilson病基因(ATP7B基因)第9,14外显子突变特性,方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)银染技术初步研究了141例Wilson病患者ATP7B基因第9及14外显子分子结构改变,结果:通过用PCR-SSCP对患者和正常人的DNA的电泳带迁移作对比分析,发现在患者中第9和14外显子PCR扩增产物迁移异常者分别为6...
采用PCR-SSCP法,对50株MTL型临床分离株进行测试。同时,进行常规的药敏实验。然后,对比检测的结果。结果:在96例肺结核标本中,有54份被检出为MTL型,占56.3%,包括42例人型结核分支杆菌,12例牛型结核分支杆菌。在药敏试验中,将50株MTL型临床分离株作为研究对象。其中,有24株敏感,耐药率为52%。通过PCR-SSCP分析...
(一)PCR-单链构象多态性(PCR-single-strand conformation polymorphism,SSCP) PCR-SSCP是近年来发展起来的一种分析突变基因的方法,由于该方法对检测基因 的单个碱量置换和某一片段DNA突变位点的筛查提供了有效而快速的手段,现已广泛 应用于遗传及恶性肿癌基因突变的分析. ...