银染方法与PCR-SSCP结合,尤其是直接溴乙锭染色方法的应用,使得该方法大大简化。 最近,SSCP值得注意的改进是将DNA-SSCP分析,改为RNA-SSCP分析,其基本原理是: RNA有着更多精细的二级和三级构象,这些构象对单个碱基的突变很敏感,从而提高 了检出率,其突变检出率可达90%以上。另外,RNA不易结合成双链,因此可以较大量 ...
电压过高也是引起温度 升高的主要原因,因此,在没有冷却装置的电泳槽上进行SSCP时,开始的5min应用较 高的电压(250V),以后用100V左右电压进行电泳.这主要是由于开始的高电压可以使 不同立体构象的单链DNA初步分离,而凝胶的温度不会升高.随后的低电压电泳可以使 之进一步...
一:PCR-SSCP技术原理及特点 •①PCR扩增靶DNA •②将特异的PCR扩增产物变性,而后快速复性 •③将适量的单链DNA进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 •④通过放射性自显影、银染或溴化乙锭显色分析结果 二:PCR-SSCP技术基本过程 •结果分析 若发现单链DNA带迁移率与正常对照的相比发生改变,就可以判 定该链构象发生...
1、代谢抑制试验:根据特异性抗体能阻止支原体的生长及代谢这一特性,可采用已知高效价的免疫血清进行代谢抑制试验 以鉴别各种支原体。测定分解葡萄糖支原体时,可在含0.5——1.0%葡萄糖的支原体培养基中加入抗血清后再接种菌液,培养后未见发酵反应,培养基颜色不变;而未加抗血清的对照管呈发酵反应,培养基...
检测原理: 单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构象发生改变,空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中受排阻大小不同。因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),可以非常敏锐地将构象上有差...
【单选题】依光路可逆原理,假定光线从左向右传播,则自光轴起所有距离向右度量( )。 查看完整题目与答案 【单选题】含不饱和脂肪酸多的脂肪是:( )。 查看完整题目与答案 【单选题】依光路可逆原理,假定光线从上向下传播,则自光轴起所有距离向上度量( )。 查看完整题目与答案 【单选题】脂肪不具备的生理功用...
一、SSCP的原理及特点 日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由 其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或 少地影响其空间构象,使构象发生改变,空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰 胺凝胶中受排阻大小不同.因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电...
基因分型定量检测系统是国际上在传染病流行病学应用中最广泛的检测诊断系统。主要通过基因芯片对HPV、HSV等DNA病毒进行检测,分析基因表达的类型,了解基因功能,从而指导疾病的诊断、预后、病理分析、治疗等各种研究。基因芯片主要用于DNA 突变分析、基因谱差异分析、基因诊断分析和大规模基因类型分析。 基...
检测原理: 单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构象发生改变,空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中受排阻大小不同。因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),可以非常敏锐地将构象上有差...