正确答案:聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长...
SSCP是单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的缩写。其原理是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象,因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就是说在相同...
PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,单链DNA在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时形成不同的立体构象,其构象直接影响泳动速率,相同长度的 DNA单链其核苷酸顺序仅有单个碱基的差别,就可以产生立体构象的不同,造成泳动速率的不同,产生不同的泳动带。工具/原料 设计好引物,需要使用的试剂 方法...
PCR-SSCP技术是一种分子生物学分析方法,由日本Orita等于1989年创建,是筛查突变的新技术。这种技术结合了PCR(聚合酶链式反应)和SSCP(单链构象多态性)的原理。PCR技术是一种在引物参与下,由酶催化特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。它具有灵敏度高、简便、快速的特点,且对标本的纯度要求低。而SSCP技术...
的研究进展.一、点突变的PCR直接检出 (一)用PCR直接检测缺失: 当基因内缺失时,可用已知的该基因DNA序列在缺失片段的两侧设计一对引物, 然后进行PCR,对其产物行琼糖凝胶电泳,溴乙锭染色,紫外检测仪下检测有无特异 性的扩增产物,即可非常容易的判断待检称本中有无DNA片段的缺失.
1、原理 PCR-SSCP是1989年日本关谷实验室结合PCR反应和单链DNA非变性聚丙烯胺电泳首先创立的,其基本原理是:在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,DNA单链的迁移率除与DNA链的长短有关外,更主要的是取决于DNA单链所形成的构象。在非变性条件下,DNA单链可自身折叠形成具有一定空间结构的构象。这种构象由DNA单链...
5.用蒸馏水浸泡聚丙烯酰胺凝胶,观察PCR-SSCP结果。结果判断 观察并记录聚丙烯酰胺凝胶上的DNA单链带,...
(2)PCR-SSCP技术:是聚合酶链反应一单链构象多态性分析(single strand conformation polymorphism)的简称,原理是将经扩增的DNA片段经过变性处理,形成单链,由于序列不同,单链构象就有差异在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳的迁移率不同,通过与标准物的对比,即可检测出有无突变,该技术已广泛应用于检测各种病原体基因的点突变...