细胞传代是细胞培养技术中最基础也是最重要的环节,是细胞实验开展的必备技能,好的细胞传代技术不仅能实现理想的实验结果,同时也可以节约时间和实验成本。 1. 什么是传代培养? 传代又称继代培养,是指去除培养基并将细胞从原培养物转移到新鲜的生长培养基中,通过这一操作使细胞进一步繁殖。传代培养的时间与细胞增殖的特...
培养容器(培养瓶、培养板、培养皿)的规格型号,细胞数以Hela细胞为例,如表所示: 二、贴壁细胞传代步骤 1. 准备工作 观察细胞:在显微镜下检查细胞生长状况,确保细胞达到适合的汇合度(通常为70~90%)。 将细胞完全培养基和胰蛋白酶-EDTA(质量体积比为0.25%的胰蛋白酶+0.53mmol/L的EDTA)放入37℃水浴中加热约15min。
解析 细胞培养传代: 当细胞增殖至一定密度后,分离出一部分细胞接种到其她容器,并及时更新培养液,使细胞增殖继续,这一过程叫传代。结果一 题目 传代细胞培养: 答案 原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞：以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞，在超净工作台中操作，吸去培养皿中的旧培养基，加入1-2 mL的PBS溶液，轻轻润洗，漂洗细胞以除去残留的血清。2. 吸去培养皿中的PBS溶液，加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液（消化液能够覆盖细胞即可...
2、细胞复苏 注意:细胞从液氮拿出来之后一定要迅速解冻。 3、细胞传代 当培养细胞增殖达到一定密度(70%-80%)后,将会出现密度抑制现象,表现为细胞的生长和分裂速度逐渐减慢,甚至停止。贴壁细胞会在培养瓶中长成致密单层(悬浮细胞会充满整个体积的培养液),并铺满培养瓶底部,如果不及时进行分瓶处理,细胞将会逐渐走向...
以下是细胞传代的基本步骤: 准备工作:在开始传代之前,新的培养皿需要经过严格的消毒处理。通常,我们会使用70%的乙醇或其他消毒剂进行消毒,并在无菌条件下放置一段时间以确保干燥。 细胞分离:当细胞达到适当的密度时,就可以进行分离了。首先,将培养基从旧的培养皿中吸走,然后用PBS或其他细胞缓冲液冲洗细胞。接下来,...
一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞,在超净工作台中操作,吸去培养皿中的旧培养基,加入1-2 mL的PBS溶液,轻轻润洗,漂洗细胞以除去残留的血清。 2. 吸去培养皿中的PBS溶液,加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶...
细胞传代培养是细胞培养的常规方法之一,当细胞随着培养时间的延长和细胞分裂时,细胞之间会发生接触和接触,生长速度减慢甚至停止,并且也会因营养不足和代谢产物的积累而不利于细胞生长或中毒。因此,一旦细胞在培养瓶中长满,就需要稀释并接种到多个培养瓶中,细胞才能继续生长。
1、直接传代法 ①待悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄),即可传代; ②用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3; ③加入适量的新鲜培养基,继续培养。 2、离心传代法 ①将细胞悬液转移到离心管内; ②150g离心5min,弃上清; ③使用新鲜的培养基重悬细胞; ...