细胞传代是细胞培养技术中最基础也是最重要的环节,是细胞实验开展的必备技能,好的细胞传代技术不仅能实现理想的实验结果,同时也可以节约时间和实验成本。 1. 什么是传代培养? 传代又称继代培养,是指去除培养基并将细胞从原培养物转移到新鲜的生长培养基中,通过这一操作使细胞进一步繁殖。传代培养的时间与细胞增殖的特...
传代:去除原培养基并将细胞从原培养体系转系到新鲜的生长培养基中,该过程可使细胞系或细胞株进一步增殖。 接种后培养细胞的生长将从延滞期进入对数期,细胞呈指数增殖。当贴壁培养的细胞已占据所有可用基质、没有扩增空间,或者悬浮培养的细胞已超过培养基所能支撑的能力,无法进一步生长时,细胞增殖速度将大大降低甚至完...
细胞培养传代: 当细胞增殖至一定密度后,分离出一部分细胞接种到其她容器,并及时更新培养液,使细胞增殖继续,这一过程叫传代。结果一 题目 传代细胞培养: 答案 原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足或由于...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞,在超净工作台中操作,吸去培养皿中的旧培养基,加入1-2 mL的PBS溶液,轻轻润洗,漂洗细胞以除去残留的血清。2. 吸去培养皿中的PBS溶液,加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液(消化液能够覆盖细胞即可...
什么是细胞传代?就像是把密密麻麻的水稻苗稀稀落落地插在稻田里,细胞传代就是生长的细胞进行分瓶,稀释,使之以较好的状态继续扩增生长的过程。 具体来讲,随着培养时间的延长,细胞不断分裂、密度增加,细胞之间发生接触性抑制,使生长速度减慢,且因营养物不足和代谢物积累使细胞状态变差甚至死亡。为了使细胞保持好的生...
(1)细胞密度 哺乳动物细胞:贴壁培养细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时即应进行传代。正常细胞达到汇合状态时会停止生长(接触抑制),重新接种后需要较长时间才能恢复。转化细胞即使达到汇合状态也能继续增殖,但是在经过大约两个倍增时间后通常会变质。类似地,悬浮培养的细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时也应进行传...
细胞传代图解:【预热含10%血清的DMEM培养基、PBS、0.25%胰酶】Tips:作为热源的金属珠浴,要留意定期消毒哦~【从培养箱拿出细胞,镜下观察细胞状态,并判断是否达到了可传代的密度】【回到超净台中,吸去培养基,加入PBS,晃一晃,润洗一遍】可重复以上动作,用PBS再次清洗,防止残留培养液中的血清影响胰酶效果。...
仪器:CO₂培养箱,显微镜,超净台,离心机 实验步骤 步骤一 1.从培养箱取出细胞,镜下观察细胞状态,并判断是否达到了可传代的细胞密度。 步骤二 2.将超净台和所需耗材紫外照射灭菌30min。37℃水浴预热胰酶、PBS缓冲液、完全培养基。 步骤三 3.紫外结束...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞,在超净工作台中操作,吸去培养皿中的旧培养基,加入1-2 mL的PBS溶液,轻轻润洗,漂洗细胞以除去残留的血清。 2. 吸去培养皿中的PBS溶液,加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液(消化液能够覆盖细胞即可),吸...