在倒置显微镜下观察细胞的形态和生长密度,当细胞生长至80%~90%满时,即可进行传代。三、消化细胞 吸掉或倒掉培养瓶内的旧培养基。加入适量的PBS,轻轻摇动培养瓶以清洗细胞,然后弃去PBS。重复此步骤1~2次。加入适量的胰蛋白酶,确保胰蛋白酶均匀覆盖整个培养瓶底。胰蛋白酶的用量和消化时间根据细胞种类和密度而...
取出细胞:从培养箱内取出细胞培养瓶,注意旋紧瓶盖以防止污染。用酒精棉球擦拭显微镜的台面,然后在倒置显微镜下观察细胞的形态和生长密度。当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。三、消化细胞 去除旧培养基:吸掉或倒掉培养瓶内的旧培养基。PBS清洗:加入适量的PBS清洗细胞1~2次,轻轻摇动培养瓶,然后弃去PBS...
液,加入新鲜培养基,混合均匀,放入CO2 培养箱培养。 4.7 若不需立即去除冷冻保存剂,则在解冻培养后隔日更换培养基。 细胞传代培养 1. 细胞生长至高密度时,即须分殖至新的培养瓶中,一般稀释比例为1:3 至1:6,依细胞 种类而异。 2. 材料: 2.1. 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca...
以下是细胞传代的基本步骤: 准备工作:在开始传代之前,新的培养皿需要经过严格的消毒处理。通常,我们会使用70%的乙醇或其他消毒剂进行消毒,并在无菌条件下放置一段时间以确保干燥。 细胞分离:当细胞达到适当的密度时,就可以进行分离了。首先,将培养基从旧的培养皿中吸走,然后用PBS或其他细胞缓冲液冲洗细胞。接下来,...
1. 配制完全培养基 (DMEM基础培养基+10%FBS+1%双抗,不同细胞完全培养基不同,本实验以MDA-MB-231细胞为例); 2. 取复苏后培养24h后的细胞,在显微镜下观察细胞密度和生长状态,若细胞密度长至90%左右,可以传代; 3. 将细胞培养液倒入废液缸,沿着瓶身侧面加入少量的PBS,轻轻晃动瓶身使PBS充分接触细胞,冲洗后将...
细胞传代培养操作步骤如下:(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的胰蛋白酶,一般应覆盖整个培养瓶底。(4)把培养瓶放入37℃ CO2...
以下是细胞传代培养的操作步骤:一、实验准备在进行传代培养之前,需要准备好所需的实验器材和试剂,包括细胞培养皿、细胞刮刀、胰蛋白酶、PBS缓冲液、培养基等。同时,还需确保实验室内无菌环境,进行消毒处理,确保实验操作在无菌条件下进行。二、细胞接种将原代细胞或已传代的细胞从液氮或细胞库中取出,恢复生长。待...
百度试题 题目细胞传代培养的步骤?相关知识点: 试题来源: 解析 ①准备 ②消化 ③终止消化 ④计数 ⑤传代 ⑥观察 反馈 收藏
如果细胞长满至80%~90%,且看起来健康、有活力,则可以进行传代。 3.消化细胞:向培养瓶中加入适量的胰酶溶液,使细胞被充分覆盖。消化时间根据细胞类型和培养条件有所不同,通常为1至3分钟。 4.终止消化:加入完全培养液终止消化过程。这有助于将细胞从消化液中悬浮起来。 5.离心处理细胞:将细胞悬液在1500至1000 ...