1.细胞保种2.其他类型的细胞实验安排 材料与仪器 材料:细胞试剂:0.25% 胰蛋白酶工作液;RPMI1640培养基(含 10% 小牛血清)仪器,耗材:倒置显微镜,CO2 细胞培养箱、吸管、培养瓶/皿、 超净工作台、封口膜、酒精 细胞传代步骤 一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长...
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。二、 悬浮细胞传代操作步骤 悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。(1)直接传代法 ① 悬浮细胞...
(1)悬浮细胞直接收集培养容器中的所有细胞悬液至离心管中。(2)贴壁/半贴壁细胞需要对细胞进行消化处理,步骤如下:① 用PBS洗涤细胞2次。洗涤过程中注意动作轻柔,清洗全面。贴壁细胞直接弃去培养容器中的培养上清。用PBS洗涤细胞2次,洗涤后的PBS直接弃去,无需保留。半贴壁细胞需收集培养容器中的培养上清至离心...
如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是( ) ①切取组织②制备细胞悬浮液③原代培养④传代培养 A. 步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B. 步骤②中用
表1.悬浮细胞与贴壁细胞的比较: 贴壁细胞传代 您已检查细胞培养物的融合度,并且它们已准备好传代。接下来该做什么?传代贴壁细胞主要有四个步骤: 1、PBS洗涤 2、消化/解离 3、终止消化 4、接种 ...
(1)直接传代法 ① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代; ② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3; ③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。 (2)离心传代法 ① 将细胞悬液转移到离心管内; ② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清; ...