1.细胞保种2.其他类型的细胞实验安排 材料与仪器 材料：细胞试剂：0.25％ 胰蛋白酶工作液；RPMI1640培养基（含 10％ 小牛血清）仪器，耗材：倒置显微镜，CO2 细胞培养箱、吸管、培养瓶/皿、 超净工作台、封口膜、酒精 细胞传代步骤 一、贴壁细胞：以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长...
细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。二、 悬浮细胞传代操作步骤 悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。（1）直接传代法 ① 悬浮细胞...
在传代培养细胞时应使用不含钙和镁的盐溶液,因为钙和镁都会促进细胞聚集。 二、消化/解离 通过破坏细胞蛋白与培养皿表面的相互作用,细胞可以从培养皿中释放出来。不同类型的细胞在粘附培养皿底部方面具有不同的特性。一些细胞仍然像小球一样,几乎不与培养皿接触,而另一些细胞则平铺并覆盖多层...
⑦从培养箱内取出悬浮细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用75%酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 ⑧静置:超净工作台内将需传代的培养瓶直立静置半小时左右,待大部分细胞都沉降到细胞瓶底,轻轻吸出1/2~2/3的旧培养基。 ⑨分瓶:加入新鲜培养液,按1∶2或1∶3的比例分装到2或3个培养瓶中,再逐瓶加...
细胞传代 1. 预热完全培养基（贴壁和半贴壁细胞还需要预热胰酶和PBS）。2. 细胞收集。（1）悬浮细胞直接收集培养容器中的所有细胞悬液至离心管中。（2）贴壁/半贴壁细胞需要对细胞进行消化处理，步骤如下：① 用PBS洗涤细胞2次。洗涤过程中注意动作轻柔，清洗全面。贴壁细胞直接弃去培养容器中的培养上清。用PBS洗涤...
悬浮培养细胞传代步骤: 1.事先将*培养基自冰箱内拿出,平衡至室温。 2.使用移液枪吹打重悬培养在静置培养容器内的细胞,使细胞悬液充分混匀。取适量细胞悬液用血球计数板计算细胞密度。 3. 根据说明书推荐的zui低接种密度及步骤2算出的细胞密度,计算需要接种到新培养容器内的细胞悬液体积以及需要加入的新鲜培养基...
如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是( ) ①切取组织②制备细胞悬浮液③原代培养④传代培养 A. 步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B. 步骤②中用
(2022 ·树恩中学期中)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。 下列相关叙述正确的是()白①切取组织②制备细胞悬浮液 ③原代培养④传代培养 A.步骤①不需要在无菌环境中进行操作 B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D.步骤④培养过程中不会发生细胞遗传物质改...
一、细胞传代培养原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。