从培养箱内取出细胞培养瓶，旋紧瓶盖以防止污染。在倒置显微镜下观察细胞的形态和生长密度，当细胞生长至80%～90%满时，即可进行传代。三、消化细胞 吸掉或倒掉培养瓶内的旧培养基。加入适量的PBS，轻轻摇动培养瓶以清洗细胞，然后弃去PBS。重复此步骤1～2次。加入适量的胰蛋白酶，确保胰蛋白酶均匀覆盖整个培养瓶底。
3.1.4. 轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量之新鲜培养基,以吸管上下吸放数 次以打散细胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常 培养条件培养。 3.2.悬浮型细胞(suspension cell) 3.2.1. 吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000 rpm 5 分钟。 3.2.2. 吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和...
PBS清洗：加入适量的PBS清洗细胞1~2次，轻轻摇动培养瓶，然后弃去PBS。这一步的目的是去除残留的血清和培养基，以及细胞代谢产物。加入胰蛋白酶：根据培养瓶大小向瓶内加入适量胰蛋白酶（含有EDTA），确保胰蛋白酶均匀覆盖整个培养瓶底。胰蛋白酶的作用是消化细胞间的蛋白质，使细胞分散成单个细胞。消化：将培养瓶放...
以下是细胞传代的基本步骤: 准备工作:在开始传代之前,新的培养皿需要经过严格的消毒处理。通常,我们会使用70%的乙醇或其他消毒剂进行消毒,并在无菌条件下放置一段时间以确保干燥。 细胞分离:当细胞达到适当的密度时,就可以进行分离了。首先,将培养基从旧的培养皿中吸走,然后用PBS或其他细胞缓冲液冲洗细胞。接下来,...
百度试题 题目细胞传代培养的步骤?相关知识点: 试题来源: 解析 ①准备 ②消化 ③终止消化 ④计数 ⑤传代 ⑥观察 反馈 收藏
1. 扩增细胞数量 2. 避免因细胞进入平台期乃至衰亡期而大量死亡 二、实验原理 当培养的细胞增殖达到一定密度后,将会出现密度抑制现象,表现为细胞的生长和分裂速度逐渐减慢,甚至停止。贴壁细胞会在培养瓶中长成致密单层 (悬浮细胞会充满整个体积的培养液),铺满培养瓶底部,此时如果不及时进行分装再培养,即传代培养,细...
以下是细胞传代培养的操作步骤：一、实验准备在进行传代培养之前，需要准备好所需的实验器材和试剂，包括细胞培养皿、细胞刮刀、胰蛋白酶、PBS缓冲液、培养基等。同时，还需确保实验室内无菌环境，进行消毒处理，确保实验操作在无菌条件下进行。二、细胞接种将原代细胞或已传代的细胞从液氮或细胞库中取出，恢复生长。待...
如果细胞长满至80%~90%,且看起来健康、有活力,则可以进行传代。 3.消化细胞:向培养瓶中加入适量的胰酶溶液,使细胞被充分覆盖。消化时间根据细胞类型和培养条件有所不同,通常为1至3分钟。 4.终止消化:加入完全培养液终止消化过程。这有助于将细胞从消化液中悬浮起来。 5.离心处理细胞:将细胞悬液在1500至1000 ...
细胞传代培养是实验室中常见的操作,主要用于扩大细胞数量和保持细胞特性。当原代细胞培养成功后,需要进行传代培养,否则细胞会因空间不足或密度过大而影响生长。传代培养的过程包括细胞的分离、稀释和转移到新的培养瓶中。🔍 操作步骤: 移除旧培养液:首先,吸掉或倒掉培养瓶内的旧培养液。