1. 配制完全培养基 (DMEM基础培养基+10%FBS+1%双抗,不同细胞完全培养基不同,本实验以MDA-MB-231细胞为例); 2. 取复苏后培养24h后的细胞,在显微镜下观察细胞密度和生长状态,若细胞密度长至90%左右,可以传代; 3. 将细胞培养液倒入废液缸,沿着瓶身侧面加入少量的PBS,轻轻晃动瓶身使PBS充分接触细胞,冲洗后将...
如果细胞长满至80%~90%,且看起来健康、有活力,则可以进行传代。 3.消化细胞:向培养瓶中加入适量的胰酶溶液,使细胞被充分覆盖。消化时间根据细胞类型和培养条件有所不同,通常为1至3分钟。 4.终止消化:加入完全培养液终止消化过程。这有助于将细胞从消化液中悬浮起来。 5.离心处理细胞:将细胞悬液在1500至1000 ...
百度试题 题目细胞传代培养的步骤?相关知识点: 试题来源: 解析 ①准备 ②消化 ③终止消化 ④计数 ⑤传代 ⑥观察 反馈 收藏
实验步骤 以HEK-293T细胞传代为例 1. 从培养箱拿出细胞，镜下观察细胞状态，并判断是否达到了可传代的密度；2. 回到超净台中，吸去培养基，加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸去PBS，加入0.25%胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；3. 放入37℃培养箱，开始消化并计时，消化时间跟据细胞特性有所不...
细胞传代培养操作步骤如下：（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的胰蛋白酶，一般应覆盖整个培养瓶底。（4）把培养瓶放入37℃ CO2...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞：以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞，在超净工作台中操作，吸去培养皿中的旧培养基，加入1-2 mL的PBS溶液，轻轻润洗，漂洗细胞以除去残留的血清。2. 吸去培养皿中的PBS溶液，加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液（消化液能够覆盖细胞即可...
细胞常规培养、传代步骤(请严格遵守无菌操作) 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm培养皿中,加入约 6ml 培养基,培养...
细胞传代 1. 预热完全培养基（贴壁和半贴壁细胞还需要预热胰酶和PBS）。2. 细胞收集。（1）悬浮细胞直接收集培养容器中的所有细胞悬液至离心管中。（2）贴壁/半贴壁细胞需要对细胞进行消化处理，步骤如下：① 用PBS洗涤细胞2次。洗涤过程中注意动作轻柔，清洗全面。贴壁细胞直接弃去培养容器中的培养上清。用PBS洗涤...
采用无菌吸管轻轻吹打细胞表面,注意吹打全部培养表面,可以按照先左右吹打,后上下吹打的方式,取所有细胞悬液放入一干净的 15ml 离心管内。每分钟 800 转,室温离心 5min。 三、细胞传代的步骤-制备细胞悬液及培养 吸弃上清液,不要吸到底部的细胞沉淀。向离心管内的细胞沉淀加入适量完全培养基。吹打混匀,吹打过程中...