培养容器(培养瓶、培养板、培养皿)的规格型号,细胞数以Hela细胞为例,如表所示: 二、贴壁细胞传代步骤 1. 准备工作 观察细胞:在显微镜下检查细胞生长状况,确保细胞达到适合的汇合度(通常为70~90%)。 将细胞完全培养基和胰蛋白酶-EDTA(质量体积比为0.25%的胰蛋白酶+0.53mmol/L的EDTA)放入37℃水浴中加热约15min。
细胞传代是细胞培养技术中最基础也是最重要的环节,是细胞实验开展的必备技能,好的细胞传代技术不仅能实现理想的实验结果,同时也可以节约时间和实验成本。 1. 什么是传代培养? 传代又称继代培养,是指去除培养基并将细胞从原培养物转移到新鲜的生长培养基中,通过这一操作使细胞进一步繁殖。传代培养的时间与细胞增殖的特...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞：以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞，在超净工作台中操作，吸去培养皿中的旧培养基，加入1-2 mL的PBS溶液，轻轻润洗，漂洗细胞以除去残留的血清。2. 吸去培养皿中的PBS溶液，加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液（消化液能够覆盖细胞即可...
一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞,在超净工作台中操作,吸去培养皿中的旧培养基,加入1-2 mL的PBS溶液,轻轻润洗,漂洗细胞以除去残留的血清。 2. 吸去培养皿中的PBS溶液,加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞:以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞,在超净工作台中操作,吸去培养皿中的旧培养基,加入1-2 mL的PBS溶液,轻轻润洗,漂洗细胞以除去残留的血清。 2. 吸去培养皿中的PBS溶液,加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液(消化液能够覆盖细胞即可),吸...
1.直接给带传代的培养瓶中补充一定量的新鲜培养基,然后将进行分装。 2.先通过离心弃掉营养匮乏的旧培养基,然后再用适量的新鲜培养基重悬细胞沉淀,最后将其分装至培养瓶中即可。 悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。 所需材料 • 装有悬浮细胞的培养...
1. 从培养箱拿出细胞，镜下观察细胞状态，并判断是否达到了可传代的密度；2. 回到超净台中，吸去培养基，加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸去PBS，加入0.25%胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；3. 放入37℃培养箱，开始消化并计时，消化时间跟据细胞特性有所不同，例如HEK-293T细胞消化时间为2...
题目 传代细胞培养: 答案 原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,将影响细胞的生长,这一分离培养称为传代细胞培养。相关...
(1)细胞密度 哺乳动物细胞:贴壁培养细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时即应进行传代。正常细胞达到汇合状态时会停止生长(接触抑制),重新接种后需要较长时间才能恢复。转化细胞即使达到汇合状态也能继续增殖,但是在经过大约两个倍增时间后通常会变质。类似地,悬浮培养的细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时也应进行传...