染料法一般使用的是SYBR Green I染料,这是一种可以与双链DNA小沟结合的荧光染料,其不会与单链DNA结合,且在游离状态下几乎无荧光,只有与双链DNA结合才会发出荧光,因此将PCR扩增产生的双链DNA数量与荧光强度直接关联,产生实时监测的效果。 SYBR Green染料法优点 ☑ 通用性好,适合进行大多数类型的定量反应,可以进行...
Fig. 1 一步与两步RT-qPCR流程对比 Table 1 RT-qPCR一步法和两步法比较 AllStart®/ATG® HSOne Step RT-qPCR SYBR Green Kit (ATG #R305 & ATG #R405) 基于 SYBR Green I 嵌合荧光法,针对以RNA为模板 (如RNA类病毒) 的荧光定量PCR快速检测设计,结合使用基因特异性引物,可使逆转录和qPCR反应在一...
SYBR Green染料法相对定量qPCR实验 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 实验材料:动物组织或血液 试剂/试剂盒:RNA提取试剂盒、Quantscript RT Kit试剂盒、荧光定量PCR Mix (SYBRGreenRealtimePCRMasterMix)、TRIZON...
1、荧光染料法（SYBR Green）：SYBR Green Ⅰ是荧光定量PCR中最常用的荧光染料，它能与所有的双链DNA...
在采用SYBR Green染料法进行实验时，引物设计是一个至关重要的环节。由于SYBR Green染料能广泛地与双链DNA结合，不仅限于特异性序列，因此，精心设计引物以减少非特异性结合至关重要。同时，确保使用高质量的模板DNA，以提高扩增的特异性。此外，为确保实验结果的准确性，建议在扩增后通过熔解曲线分析进行进一步的质量...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...
Sybr Green法的实验策略: 实验可分为三个阶段,即实验条件的优化、预实验和正式实验。 一、实验条件的优化阶段,这一阶段是最花时间的, 1、要找到一个阳性的模板,可以是克隆有基因质粒、强阳性样本或纯化的PCR产物等。有了阳性的模板才能进行最基本的定量扩增实验,如果有普通PCR的实验条件,也可以此为基础进行实验...
SYBR Green法检测解脲支原体感染的荧光PCR试剂盒.docx,PAGE 1 - SYBR Green法检测解脲支原体感染的荧光PCR试剂盒 一、 试剂盒概述 (1)本试剂盒采用SYBRGreen荧光染料法,专门针对解脲支原体(Ureaplasmaurealyticum)的核酸检测,具有高灵敏度、高特异性和快速检测的特点。
正是基于这一特性，我们可以在PCR反应体系中加入过量的SYBR Green I染料，利用其与DNA双链的特异性结合来发射荧光信号。通过检测这些荧光信号，我们可以准确地判断出PCR体系中双链DNA的数量。这种染料法的应用，不仅提高了实验的灵敏度和准确性，更为我们的分子生物学研究带来了更多的可能性。【SYBR Green I法引物...
在日常qPCR实验中相信很多老师都听说过染料法,如SYBR Green 染料法,通过SYBR Green 染料与PCR过程中产生的双链DNA结合,从而对聚合酶链式反应(PCR)的产物进行检测。具体实验过程如图1所示: 1 在PCR过程中,DNA聚合酶可对目标序列进行扩增,以产生PCR产物,即“扩增子”。