可以有效提高定量PCR的效率，当荧光染料 SYBR Green I 与 DNA 双螺旋结合时，在溶液中，未结合的染料显示出较小的荧光，而当它与DNA 结合后荧光就会急剧增强。由于 SYBR Green I 染料较为稳定（在 30 次扩增循环中仅损失 6% 的活性）并且 LightCycler 仪器的滤光片组与激发和发射波长相匹配，所以它常常被用于...
1、荧光染料法（SYBR Green）：SYBR Green Ⅰ是荧光定量PCR中最常用的荧光染料，它能与所有的双链DNA...
在定量PCR(也称rt-PCR或qPCR)中,荧光信号是由荧光探针或荧光DNA结合染料(如SYBR Green)产生,其强度与PCR产物分子(扩增子)的数量成正比。每个循环结束时,收集荧光信号强度,通过将荧光强度与循环数作图,qPCR仪生成扩增曲线,其表示在整个PCR过程中产物的累积,通过这个过程,即可实现量化。如果样品中特定的序列(DNA或RNA)...
实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 实验材料:动物组织或血液 试剂/试剂盒:RNA提取试剂盒、Quantscript RT Kit试剂盒、荧光定量PCR Mix (SYBRGreenRealtimePCRMasterMix)、TRIZON试剂、琼脂糖、MOPS、DEPC等。 实...
SYBR Green,又名SYBR Green I,是一种荧光染料,正是因为它,才使得Real-Time PCR能够实现定量检测,取得了极大的成功。 二、SYBR Green荧光染料的原理 SYBR Green是一种荧光染料,可以被用于Real-Time PCR技术,并能反映在PCR过程中特定DNA基序列扩增的变化。SYBR Green染料是一种可被氨基酸体系吸收的荧光染料,可以在...
sybr green荧光定量pcr原理sybr green荧光定量pcr原理 Sybr Green I的实际名称是二(4-羟基苯基)-6(4-甲氧基苯基)-三甲基吡啶三乙酸铵,是由美国绿色流动技术(Invitrogen)推出的一种新型定量荧光染料。荧光染料可以与双链DNA或RNA特异性结合,在发光光度受到激活基因上的复制影响时,就可以快速、特异性地检测到基因表达...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...
介绍 荧光定量PCR（qPCR），利用荧光探针或荧光DNA结合染料（如SYBR Green）产生荧光信号，该信号强度与PCR产物分子（扩增子）的数量成正比。每次循环结束时，收集荧光信号强度，生成扩增曲线，表示整个PCR过程中产物的累积。通过此过程，实现量化。样品中特定序列（DNA或RNA）丰富时，在早期循环中观察到扩增...
在定量PCR（rt-PCR或qPCR）中，荧光信号由荧光探针或荧光DNA结合染料（如SYBR Green）产生，其强度与PCR产物分子（扩增子）的数量成正比。每次循环后收集荧光信号强度，通过绘制荧光强度与循环数的图，qPCR仪器生成扩增曲线，表示PCR过程中的产物累积。样品中特定序列（DNA或RNA）丰富时，扩增在较早循环中...