比如 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCB...
建议你去借分子克隆实验指南来看看,或者采用引物设计软件,比如primer premier 5,把序列输入就可以得到不同打分的引物对 SuperScript 一步法rt-pcr试剂盒-赛默飞 SuperScript IV一步法RT-PCR试剂盒,对于难以处理的RNA样本,更快速,轻松地获得更佳结果用于提高热稳定性,持续合成能力,cDNA产量广告 PCR的引物可以是RNA? ...
两步法的话,第一步就不用基因特异引物,直接用oligo dt引物(或者oligo dt+随机引物),反转录得到的整套cDNA模板,也就包括了目的基因模板。第二步,再用Primer5.0设计特异引物扩增就行了。
建议到UCSC genome browser上看,那里每个基因的extron 用大写字母表示,而Intron用小写字母。比较直观。设计引物建议用软件,比较好的免费网页有Primer3. 至少要有一个引物是跨intron extron交界点。这样可以保证不会扩增残留的DNA。只扩增cDNA。
请问,T-DNA插入是在ATG前面15 bp处,位于启动子区域,怎样设计RT-PCR的引物来鉴定突变体?我自己想的...
primer premier 6和oligo结合使用
可以去影响因子较高的文献里找,然后去pubmed中blast一下就好;也可以用引物设计软件合成,合成原则在网上都可以找到的,合成好了也要blast。两个都是看家基因,均可作为内参,我们实验室用的是GALDH
设计定量引物,像actin,他是一个大家族,有很多成员,每个成员按理说也是有特意性,在不同组织表达量...
如何设计miRNA的RT引物和定量PCR的检测引物 ?
如何设计miRNA的RT引物和定量PCR的检测引物 ?