比如 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCB...
两步法的话,第一步就不用基因特异引物,直接用oligo dt引物(或者oligo dt+随机引物),反转录得到的整套cDNA模板,也就包括了目的基因模板。第二步,再用Primer5.0设计特异引物扩增就行了。
解析 设计引物的时候,选择扩增跨内含子的片段来设计引物.或者提取RNA的时候用专门的RNA提取试剂盒.或者提取RNA后加入一定DNA酶,消化一段时间再纯化,反转录.结果一 题目 利用RTPCR获得目的基因时,如何鉴定其中有无DNA污染?设计一套实验排除DNA造成的污染 答案 设计引物的时候,选择扩增跨内含子的片段来设计引物. ...
primer premier 6和oligo结合使用
一般是把退火温度调些。如果退火温度调高了,还是有很多杂带,则说明你的引物特异性不强,需要再重新设计引物。你指的DNA污染是指什么?提RNA时在最后一步时,加上DNA酶,保温一段时间,PCR时,可以做空白对照,如果边空白对照都能扩增出条带,则说明你的试剂盒或是蒸馏水污染了 ...
设计跨内含子的引物,扩增看看是不是有长度符合包含内含子的产物,如果有,就是有DNA污染了。
引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。
利用RTPCR获得目的基因时,如何鉴定其中有无DNA污染?设计一套实验排除DNA造成的污染 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 设计引物的时候,选择扩增跨内含子的片段来设计引物.或者提取RNA的时候用专门的RNA提取试剂盒.或者提取RNA后加入一定DNA酶,消化一段时间再纯化,反转录. 解析看不...
利用RTPCR获得目的基因时,如何鉴定其中有无DNA污染?设计一套实验排除DNA造成的污染?考试用的问答题,共两问,能再具体点吗帮帮忙啊急 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 设计跨内含子的引物,扩增看看是不是有长度符合包含内含子的产物,如果有,就是有DNA污染了. 解析看不懂?
如何设计miRNA的RT引物和定量PCR的检测引物 ?