图4 我司RNA Pull-down案例展示:(A)体外转录法电泳检测图(阳性),左图:PCR扩增DNA的电泳;右图:体外转录标记RNA的电泳;(B)RNA Pull-down的银染结果;(C)MS差异蛋白鉴定及KEGG分析。伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验,提供专业RNA Pull-down技术服务,适用于RNA与蛋白结合的领域研究,欢迎大...
区别在于RIP是从蛋白出发研究蛋白-RNA相互作用的技术,是已知一个蛋白,分析与其互作的RNA;而RNA pulldown是从RNA出发研究蛋白-RNA相互作用,是已知一个RNA,分析与其互作的蛋白。 简单来说,RNA pulldown和RIP,前者是已知RNA拉蛋白,后者是已知蛋白去拉RNA。 RNA pulldown和RIP是分子机制研究中可以用于相互佐证的两个经...
简单来说, RNA pulldown 和 RIP ,前者是已知 RNA 拉蛋白,后者是已知蛋白去拉 RNA。 RNA pulldown 和 RIP 是分子机制研究中可以用于相互佐证的两个经典技术。 2、RNA pulldown 的阴性对照探针如何选择? RNA pulldown 阴性探针一般有 lacZ 探针和目的 RNA antisense 反义链探针两种类型。 lacZ 探针是通用阴性对...
一.探针准备 1实验目的:构建hsa_circ_0007142全序列载体, 并以hsa_circ_0007142质粒全长序列为模板PCR扩增获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA,作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。 2实验材料 l主要试剂 l主要仪器及器材 3基因及载体信息 基因名称:hsa_circ_0007142 基因长度:427 nt l >hsa_circ...
二、RNA Pull Down技术实验步骤 1. 设计并合成带标签的RNA探针:根据实验目的设计并合成带标签的RNA探针,标签可以是生物素、荧光染料等。探针可以是特定基因的正义链或反义链,也可以是特定转录本的全部序列或部分序列。在设计探针时,需要注意以下几点: 1)确保探针的特异性:选择的探针应该与目标RNA具有高度特异性,以...
RNA pull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术,已成为研究焦点。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过WB实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用,或者...
RNA Pull down(RNA下拉)是一种生物实验技术,被广泛应用于研究RNA与蛋白质之间的相互作用以及寻找可能的未知RNA结合蛋白。以下是对RNA Pull down技术的详细介绍:一、基本原理 RNA Pull down技术利用带标签的RNA探针与目标蛋白质进行体外或体内结合,然后通过亲和分离或免疫共沉淀等方法将结合的复合物分离出来,最后对...
1实验目的:构建hsa_circ_0007142全序列载体, 并以hsa_circ_0007142质粒全长序列为模板PCR扩增获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA,作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。 2实验材料 l 主要试剂 l 主要仪器及器材 3基因及载体信息 基因名称:hsa_circ_0007142 ...
构建hsa_circ_0007142全序列载体,以hsa_circ_0007142质粒全长序列为模板进行PCR扩增,获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。实验材料包括主要试剂和仪器及器材。实验方法涉及PCR扩增目的片段、胶回收等步骤。实验结果通过琼脂糖凝胶电泳检测正义链和反义链PCR...
二、RNA Pull Down技术实验步骤 1. 设计并合成带标签的RNA探针:根据实验目的设计并合成带标签的RNA探针,标签可以是生物素、荧光染料等。探针可以是特定基因的正义链或反义链,也可以是特定转录本的全部序列或部分序列。在设计探针时,需要注意以下几点: 1)确保探针的特异性:选择的探针应该与目标RNA具有高度特异性,以...