图4 我司RNA Pull-down案例展示:(A)体外转录法电泳检测图(阳性),左图:PCR扩增DNA的电泳;右图:体外转录标记RNA的电泳;(B)RNA Pull-down的银染结果;(C)MS差异蛋白鉴定及KEGG分析。伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验,提供专业RNA Pull-down技术服务,适用于RNA与蛋白结合的领域研究,欢迎大...
RNA pull down:RNA沉淀检测,是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使用体外转录将RNA进行生物素标记,并与细胞蛋白裂解液孵育,形成RNA-蛋白复合物。复合物通过磁珠结合后分离,复合物纯化洗脱后通过Western blot验证检测特性的蛋白。若筛选可能结合的蛋白通过质谱实验进行检测筛选。 实验流程: 2.1生物...
【文献阅读】| 读图 | RIP、ChIP、CoIP、RNA pull down到底是些啥?| 大分子间相互作用(一) 6585 3 33:22 App RIP试剂盒实验操作步骤 1.6万 62 58:18 App GST pull-down检测技术及应用研究 4324 1 3:00:07 App Pull-down+Co-IP+IP-MS大合集(11.19日下午培训) 6426 6 10:36 App GST pull do...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
关于RNA pull down 看完这个视频就够了!, 视频播放量 3175、弹幕量 1、点赞数 66、投硬币枚数 22、收藏人数 141、转发人数 34, 视频作者 金开瑞生物, 作者简介 生物相关干货分享~技术实验、知识科普,应有尽有~,相关视频:020. 【直播精華】射多久時間才是正常?,GST pul
有,探针法和生物素标记法的对照都是相应的反义序列:探针的反义序列以及长非编码RNA的反义序列。TRSA法的对照是TRSA序列本身。 六、RNA pull down的实验如何防止RNA降解? RNA pull down实验的一大难点就是RNA本身易降解,所以过程中要禁止RNase,以防止降解。...
RNA pulldown阴性探针一般有lacZ探针和目的RNA antisense反义链探针两种类型。 lacZ探针是通用阴性对照探针,是所研究物种中不存在的序列,相当于无义序列。 Antisense反义链探针相当于目的RNA相同长度的突变探针,但是反义链不能完全排除细胞内的同源性,非特异结合风险更高。
GST pull down(GST融合蛋白沉降技术)是体外检测蛋白相互作用的常用方法, 一般来说,GST融合蛋白pull down方法用于两个方面:一是鉴定能与已知融合蛋白相互作用的未知蛋白质;二是鉴定两个已知蛋白质之间是否存在相互作用。 为排除假阳性所设的一组对照实验是在没有诱饵蛋白存在的条件下,将样品结合到GST上。该对照可以是...
RNA pull-down实验是一种用于研究RNA和RNA结合蛋白质(RNA-binding proteins,RBPs)相互作用的常用技术之一。通过将RNA探针固定在固相 介质上,然后将该探针与细胞裂解液中的RNA结合蛋白反应,最终将结合到RNA上的蛋白质通过特定的方法进行检测。 当进行RNA pull-down实验时,可以根据不同的需求选择不同的下游检测方法。
RNA pull-down用于检测RNA-蛋白质、或RNA-RNA之间相互作用的技术,其基本原理是:利用带标签的目标RNA探针与待测蛋白质或RNA进行体外或体内结合,通过亲和作用将复合物分离出来,之后采用Western Blot、质谱技术检测结合蛋白,或采用qPCR、测序技术检测结合RNA。