GST pull down(GST融合蛋白沉降技术)是体外检测蛋白相互作用的常用方法,一般来说,GST融合蛋白pull down方法用于两个方面:一是鉴定能与已知融合蛋白相互作用的未知蛋白质;二是鉴定两个已知蛋白质之间是否存在相互作用。为排除假阳性所设的一组对照实验是在没有诱饵蛋白存在的条件下,将样品结合到GST上。该对照可以是表...
图4 我司RNA Pull-down案例展示：（A）体外转录法电泳检测图（阳性），左图：PCR扩增DNA的电泳；右图：体外转录标记RNA的电泳；（B）RNA Pull-down的银染结果；（C）MS差异蛋白鉴定及KEGG分析。伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验，提供专业RNA Pull-down技术服务，适用于RNA与蛋白结合的领域研究，欢迎大...
【一次搞懂pull down 实验(上)】本视频用钓鱼来比喻实验原理,以动画的形式生动形象的进行讲解,特别适合初学pull down 实验的同学,快来学习吧。 3145 1 1:01:53 App 解析|关于RNA pull down 看完这个视频就够了! 3253 -- 12:18 App 【文献阅读】| article分享| m6A甲基化酶METTL3,转录调控因子H3K4me3,下游...
RNA pull down:RNA沉淀检测,是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使用体外转录将RNA进行生物素标记,并与细胞蛋白裂解液孵育,形成RNA-蛋白复合物。复合物通过磁珠结合后分离,复合物纯化洗脱后通过Western blot验证检测特性的蛋白。若筛选可能结合的蛋白通过质谱实验进行检测筛选。 实验流程: 2.1生物...
RNA pulldown阴性探针一般有lacZ探针和目的RNA antisense反义链探针两种类型。 lacZ探针是通用阴性对照探针,是所研究物种中不存在的序列,相当于无义序列。 Antisense反义链探针相当于目的RNA相同长度的突变探针,但是反义链不能完全排除细胞内的同源性,非特异结合风险更高。
RNA-Protein Pull Down Kit 描述 一、实验原理 RNA pull-down是研究细胞内RNA与蛋白/RNA结合情况的技术。先将RNA进行标记(如生物素标记),再与细胞裂解液共同孵育,从而形成RNA-RNA/蛋白质复合物,进而检测与之结合的RNA或蛋白质。复合物洗脱后,通过荧光定量PCR(RNA pull down-QPCR)或高通量测序(RNA pull down-se...
RNA pull-down用于检测RNA-蛋白质、或RNA-RNA之间相互作用的技术,其基本原理是:利用带标签的目标RNA探针与待测蛋白质或RNA进行体外或体内结合,通过亲和作用将复合物分离出来,之后采用Western Blot、质谱技术检测结合蛋白,或采用qPCR、测序技术检测结合RNA。
有,探针法和生物素标记法的对照都是相应的反义序列:探针的反义序列以及长非编码RNA的反义序列。TRSA法的对照是TRSA序列本身。 六、RNA pull down的实验如何防止RNA降解? RNA pull down实验的一大难点就是RNA本身易降解,所以过程中要禁止RNase,以防止降解。...
RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结合蛋⽩是否与RNA 相互作...
RNA pull-down实验是一种用于研究RNA和RNA结合蛋白质(RNA-binding proteins,RBPs)相互作用的常用技术之一。通过将RNA探针固定在固相 介质上,然后将该探针与细胞裂解液中的RNA结合蛋白反应,最终将结合到RNA上的蛋白质通过特定的方法进行检测。 当进行RNA pull-down实验时,可以根据不同的需求选择不同的下游检测方法。