整体来看,动态光散射法(DLS)作为mRNA-LNP粒径检测的一种解决方案,具有快速、重复性好、准确性高的优势。因此,国内外法规均推荐使用动态光散射(DLS)用于mRNA-LNP平均粒径及粒径分布的检测。 耀海生物质量研究服务平台,目前已具备针对30多种mRNA原液或LNP制剂成品质量属性的方法开发和检测能力。检测项目覆盖质粒纯度、...
酸水解-ID-LC-MS/MS 可通过检测氨基酸可评估mRNA-LNP中的残留蛋白,氨基酸可作为酸水解后蛋白质的标记替代物。残留蛋白质杂质mRNA疫苗/药物的关键质量属性。酸水解LNP-mRNA(荧光素酶),通过 MRM 监测五种理想的定量氨基酸(Ile、Leu、Phe、Pro 和 Val),从而进行残留蛋白定量计算。mRNA疫苗/药物中蛋白残留的绝对定量...
研究者基于质量源于设计(QbD)和实验设计(DoE)方法,开发并优化了HPLC-CAD分析方法以检测LNP脂质组分。 一、方法学简述 高效液相色谱(HPLC)与电雾式检测器(CAD)结合,是检测LNP脂质组分的推荐方法。2023年,美国药典USP更新的“Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality”草案中建议使用CAD检测器鉴别脂质组分、定...
✦ mRNA制剂分析-包封率检测 包封率是mRNA-LNP非常关键的指标,表示包裹在脂质纳米颗粒内部的RNA占全部RNA的比例,是确定LNP药物制剂精确给药剂量的基础!通过对其包封率的检测,不仅可以优化LNP相关的配方和包封参数,同时也可以监测mRNA-LNP稳定性随时间发生的改变。 对于包封率的检测,申基生物使用RiboGreen荧光染料可...
对LNP中单个脂质组分进行鉴别和定量检测是RNA疫苗/疫苗开发和生产阶段的关键质量属性。一、脂质体简介 mRNA疫苗递送的LNPs系统(如图1)，使用以下四种类型的脂质体：具有胺官能团的阳离子脂质，通过离子相互作用与mRNA相互作用；脂质-聚乙二醇偶联物，胆固醇和两性离子辅助磷脂。脂质体在储存和运输过程中容易聚集和降解，...
1.2mRNA聚集体 mRNA是单链RNA分子，可以形成二级结构和三级结构，如发夹和环，并与其他mRNA分子发生相互作用，从而形成聚集。此外，mRNA-LNP制剂在生产过程中，阳离子可电离脂质的降解成分可与mRNA分子上的碱基或者核糖形成共价加合物，从而形成大分子量的mRNA杂质。欧洲药品管理局（EMA）公开的检测方法包括通过反相液相...
2.添加LNP-mRNA样品到96孔板 这里涉及到稀释倍数的摸索,需要让LNP-mRNA样品中测到的RNA浓度落到用RNA标样测定的标准曲线范围内。比如,如果标样RNA设定的最高浓度是1000ng/ml,那么你需要根据LNP-mRNA包封时的RNA浓度,大致预测出需要稀释LNP-mRNA的倍数,可以设定一系列梯度稀释...
mRNA技术作为一种在免疫细胞中产生瞬时基因表达的新兴方法,具有安全可靠、研发迭代快、生产成本低等优势,因此将mRNA-LNP技术与免疫细胞治疗技术结合是一种行之有效的创新策略。 在本标准中涉及很多mRNA-LNP以及免疫细胞治疗产品的质控检测项目和检测方法,丹纳赫生命科学旗下贝克曼库尔特生命科学和SCIEX拥有相对应的成熟应用...
“Assessment of mRNA Payload Distribution and Capacity of LNPs by Nano-Flow Cytometry”主题报告,将重点围绕如何使用纳米流式单颗粒表征平台对mRNA-LNP粒径、浓度、空壳率/满壳率及mRNA拷贝数等指标进行快速、多参数检测,展示检测数据及分析结果,就如何提升LNP制剂开发、实现核酸拷贝数定量分析以及空壳率检测等大家...
三、使用HPLC-CAD检测mRNA-LNP脂质组分 [color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]基于HPLC/UHPLC-CAD法在COVID-19 mRNA疫苗中脂质体检测中的优势,菌菌收集并梳理了近三年相关文献,主题为HPLC-CAD检测LNP脂质组分的方法开发,相关文章汇总如下: [color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]3.1 默沙东疫苗团队使用UHPLC-CAD检测LNP组分...