05 mRNA活性检测 分别将Fluc-eGFP mRNA with N1-Me-pUTP(5'CAP)进行体内和体外转染,结果表明,不仅细胞内可高表达eGFP和Luciferse,且可在体内进行蛋白表达! 图6 mRNA活性检测 三、mRNA-LNP包封服务 eMedClub mRNA疫苗在体内发挥作用不仅需要优化抗原序列,还需要一个具备解决胞外屏障、内...
在体外转染实验中,Q1L/IL LNPs展现出最高的转染效率,能够高效地将Fluc mRNA 递递到 A549 细胞中,并在 24 小时后通过荧光素酶活性检测得到证实(图2C)。 图2 体外活性和细胞摄取机制 此外,还测试了递送 EGFP mRNA 的其他基于 CLP 的 LNP ...
但mRNA LNPs的组成、治疗效果和免疫激活谱之间的相关性，特别是Th1和Th2反应之间的平衡以及与NK细胞介导的细胞杀伤的协调性，仍需进一步研究。二、筛选靶向DCs的LNP组分 研究人员用DLin-MC3-DMA（可电离脂质）、胆固醇、DMG-PEG2000（聚乙二醇化脂质）及6种辅助磷脂（阳离子脂质DOTAP和DDAB、两性离子脂质DOPE和DSPC...
缓冲液对体内给药效果的巨大影响表明，在LNP制备中选择适宜的生物缓冲液，或可为保持mRNA-LNP的理化性质及生物学活性提供显著优势。4、结论 脂质纳米颗粒（LNP）通常通过透析或与生理缓冲液(如PBS)交换缓冲液来中和，纯化后可直接注射入生物体。此外，缓冲体系可以作为冷冻保护剂，减轻LNP制剂在低温储存时的稳定性问题。
有机溶剂提取法检测 mRNA 完整性 (A) 苯酚-氯仿提取 (B) 异丙醇-醋酸铵提取 3.4 表面活性剂萃取 甲酰胺缓冲液中的聚乙二醇十六烷基醚 (Brij® 58) 用于破坏 LNP 包膜并释放 mRNA 。在本研究中，Brij® 58将其溶解在甲酰胺中使用（Brij 也可以溶解在其他危害较小的溶剂中，例如水）。其他表面活性剂可...
冻干剂mRNA-LNP和非冻干的湿剂mRNA-LNP不同存放条件下的稳定性比较。体内表达活性 将在不同温度下存放不同时间的冻干Luc-mRNA-LNP通过IM/ID注射到小鼠体内,观察表达的荧光强度。与冻存在-80°未冻干处理的Luc-mRNA-LNP相比,冻干处理会导致Luc-mRNA表达的荧光强度发生轻微下降。将在4°存贮至少24周或者在室温下存...
为了确定靶向mRNA-LNP的内化和功能活性(mRNA翻译),将携带萤火虫荧光素酶(Luc)编码mRNA的抗CD4抗体-或对照IgG-缀合的LNP与人CD4+ T细胞一起孵育。与对照IgG/mRNA-LNPs相比,证明了抗CD4/mRNA-LNPs靶向的细胞中mRNA的有效翻译。将CD4+ T细胞与更高剂量的Luc mRNA-LNPd一起孵育产生了更高的Luc活性,证明了剂量-反应...
冻干剂mRNA-LNP和非冻干的湿剂mRNA-LNP不同存放条下的稳定性比较。 体内表达活性 将在不同温度下存放不同时间的冻干Luc-mRNA-LNP通过IM/ID注射到小鼠体内,观察表达的荧光强度。与冻存在-80°未冻干处理的Luc-mRNA-LNP相比,冻干处理会导致Luc-mRNA表达的荧光强度发生轻微下降。将在4°存贮至少24周或者在室温下存...
到 mRNA 质量特性研究和稳定性研究以及放行检测相关的理化特性与活性评价方法、安全性和残留分析等分析任务,推出安捷伦公司 mRNA-LNP 分析表征与质量控制一揽子方案,其中包括色谱、质谱、光谱等理化特性分析,以及基于细胞的活性分析和安全性评价方案,14 种不同的技术平台来支持 QC 放行检测、原辅料质量控制、生产过程监控...
导读:脂质纳米颗粒(LNPs)通过促进抗原呈递细胞的摄取、成熟和活性来增强癌症免疫治疗。尽管已知脂质成分的选择及各成分的相对比例影响体内转染效率和组织特异性递送,但缺乏辅助脂质电荷和LNPs成分相对比率对给药部位不同细胞群转染影响的深入分析。 2023年12月,约翰霍普金斯大学医学院&纳米生物技术研究所Hai-Quan Mao作为...