Co-IP和IP区别: Co-IP:研究的是体内自然状态下的蛋白质互相作用,不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。 IP:根据抗原和抗体的特异性结合,利用抗体将靶标蛋白分离或纯化,检测某一种蛋白的表达情况。 传统IP和Co-IP基本步骤: 1.添加合适的抗体。 2.抗体与目标蛋白结合。 3.添加Protein A/G使抗体-蛋...
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区别一：Co-IP作用：Co-IP，证明两个蛋白在胞内有相互作用，但是这个作用可以是直接相互作用，也可以是形成复合物后的间接相互作用。区别二：pull-down作用：pull-down，胞外纯化蛋白后证明两个蛋白之间有相互作用，这个相互作用必然是直接相互作用。区别三：Co-IP，in vivo作用：Co-IP，in vivo，可以...
2. GST pull-down可检测到利用啮齿动物细胞从组织中获得的细胞匀浆等,而CO-IP主要是进行蛋白免疫染色实验,并且其灵敏度也更高。 3. CO-IP通常只能采用单个抗体,用于检测特定的 相互作用 ,而GST pull-down使用基础载体蛋白质的普遍性使其不局限于特定的相互作用关 系 4. GST pull-down技术虽然是一种较为简单,...
GST Pull-Down实验是验证体外蛋白互作的主要方式。通过体外表达亲和蛋白-GST，将亲和蛋白固化在谷胱甘肽亲和...
GST实验是完全在体外环境提供条件让两种蛋白相互作用，体系干净，通常只有维持生理环境的盐离子和供能用的...
主页> 问答中心> 蛋白分析FAQ汇总> Co-IP和GST-pull down有什么区别? 免疫共沉淀(Co-IP)实验是在非变性条件下进行的,可以最大限度地保持蛋白质之间相互作用的天然活性。因此,Co-IP可以很好地原位反映蛋白质的真实相互作用。然而,仅使用Co-IP,我们不能确定蛋白质相互作用是直接的还是间接的。通过靶蛋白抗体免疫共...
蛋白参与的交互作用,都会用到一个共同的实验原理,叫免疫共沉淀(Immunoprecipitation),即用一个蛋白的特异性抗体去沉淀这个蛋白,与它存在结合的其他分子会被一起沉淀下来,接下来对沉淀物里的其他分子进行鉴定,核酸就用测序,蛋白就用质谱,就能分析得到与特定蛋白存在交互的其他分子。 理解了co-IP,ChIP和RIP是类似的原...
CO-IP可以分为在目的细胞中的内源性IP和在工具细胞系(一般为293T)的外源性CO-IP。而GST-Pull down可作为在原核生物中表达的蛋白,已经完全脱离了细胞环境,只有真正有相互作用的蛋白才能被拉下来。 免疫共沉淀 …