除此之外CO-IP实验还会设置一个阳性对照组（Input组），Input组为直接利用抗体X（抗体Y）对细胞裂解液进行WB检测，验证细胞裂解液中存在蛋白X(抗体Y)。在某些CO-IP实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行蛋白X和蛋白Y的WB检测，该对照组称为output组。免疫共沉淀的实验流程 免疫共沉淀实验流程为：收集蛋白样品—...
案例一：（目的蛋白不带标签进行Co-IP验证）图2 BRD9和FOXP1之间存在相互作用[1]根据结果图信息，首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用；并且二者都没有带标签，因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体；然后Input组为阳性对照，IgG为IP组的阴性对照，anti-FOXP1是IP的实验组，即...
在co-ip-ms实验中，IgG对照是一种常用的实验对照。IgG是一种免疫球蛋白，与目标蛋白质无特异性结合。因此，将IgG作为对照可以帮助我们判断实验结果是否受到非特异性结合的影响。五、为什么需要IgG对照？在co-ip-ms实验中，我们常常需要确定目标蛋白质与其他蛋白质的特异性相互作用。然而，由于实验条件的复杂性和蛋白...
实验对照的设置: 一个成功的 Co-IP 实验,首先得证明靶蛋白 X 和预测的相互作用的蛋白 Y 存在于蛋白质样品中,所以抽出来的蛋白样品要直接检测一下 X 和 Y 的存在,这个一般称为 Input。 然后要证明 IP 抗体是不是能拉下来靶蛋白,做完IP后要检测一下靶蛋白,这里要特别注意了,很多实验室用western的一抗作为 ...
IP/Co-IP实验中IgG阴性对照的意义是什么? 排除非特异性结合的可能性,例如检测一个兔子细胞的某种蛋白质,若没有设置IgG的对照,而操作中有非特异性蛋白质,又和设计的抗体有作用,就会出现阳性的结果。如果做了lgG阴性对照,对照没有出现阳性就说明没有非特异性的蛋白,对照出现阳性,说明抗体有非特异结合到杂蛋白的...
※ 试剂盒写着50T，意思是能做50次Co-IP实验？确切来说，试剂盒的50T代表着能够完成50次免疫沉淀反应，而实际上免疫共沉淀实验需要设置多个组别进行对照验证，因此具体能够完成多少次Co-IP实验由设计方案决定，一般至少需要设置阴性对照、阳性对照、实验组三个组别。※ 预清除步骤的作用是什么？必须要进行吗？这个...
碧云天自行研发生产的Flag&HA Co-IP阳性对照质粒对(Positive Control Plasmids Pair for Flag&HA Co-IP)包含pCMV-3X Flag-LTA和pCMV-HA-p53两种质粒,可以用于在哺乳动物细胞中表达N端带有3X Flag标签的人源LTA和HA标签的p53融合蛋白。因为p53和LTA蛋白间具有较强的相互作用,本质粒对可作为共转染细胞免疫共沉淀(Co...
Bovine Serum Albumin (BSA)|白蛋白 来源于牛血清(可满足大部分常规实验需求,如免疫封闭,对照等) BioBasic, >=96% 经验分子式(希尔表示法) 分子量 Beilstein Registry Number EINECS 编号 232-936-2 MDL number MFCD00130384 产品名称 制备注意事项
如果Co-IP实验的目的为验证两个已知蛋白之间的相互作用,则也可以分别给两个已知蛋白融合特定的标签,利用标签抗体实现蛋白的沉淀及沉淀复合物中目的蛋白的检测。例如,分别使蛋白X及蛋白Y融合HA、c-Myc标签,利用HA标签的特异性抗体沉淀HA-X融合蛋白,随后利用c-Myc标签的特异性抗体对沉淀下来的复合物进行c-Myc标签的检...
如果Co-IP实验的目的为验证两个已知蛋白之间的相互作用,则也可以分别给两个已知蛋白融合特定的标签,利用标签抗体实现蛋白的沉淀及沉淀复合物中目的蛋白的检测。例如,分别使蛋白X及蛋白Y融合HA、c-Myc标签,利用HA标签的特异性抗体沉淀HA-X融合蛋白,随后利用c-Myc标签的特异性抗体对沉淀下来的复合物进行c-Myc标签的检...