假阳性结果需要设置对应的阴性对照组一一排除,假设实验组为琼脂糖珠+抗体X+靶蛋白X+抗体Y+目的蛋白Y:※ 最后的实验结果是阴性的,是否能说明两个蛋白之间无相互作用?对于内源性Co-IP实验,阴性结果不能百分百说明无相互作用,也有可能是蛋白在细胞内表达过低导致,因此建议先做过表达Co-IP作为对照。
1、这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。 2、可以得到天然状态下的互作蛋白复合物。实验流程:①提取细胞或者组织总蛋白; ②免疫共沉淀实验; ③Western Blot检测目的蛋白; ④拍照记录实验结果。co-IP实验中常见的问题与解决方案:一、co-IP 实验成功的评判标准...
主页> 问答中心> 蛋白分析FAQ汇总> 导致CO-IP实验目的条带背景高的原因是什么? 可能的原因有:1、非特异蛋白结合;2、裂解液严谨度太低;3、实验仪器或液体被污染。 相关服务: CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析 提交需求 姓名* 联系类型 * 请选择手机电子邮箱qq微信 ...
使用His标签纯化目的蛋白A之后,您完全可以使用Myc标签来纯化另一个蛋白,然后进行共免疫沉淀(Co-IP)实验。这种方法允许您特异性地识别和纯化两种不同的蛋白,从而使得Co-IP实验更加精确和可靠。在实验中,您可以用抗Myc抗体捕获Myc标签蛋白,然后检测是否有His标签的蛋白A与之相互作用。这种双重标签的方法增加了实验的...