免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶联的agarose或Sepharose珠子孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经过洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10min,在高温及...
GST pull-down和CoIP有何区别?实验结果该如何解读? GST pull-down实验和CoIP实验原理是非常相似的!今天就简单介绍一下两者的异同,同时结合文献案例给大家分享一下CoIP和GST pull-down实验结果的分析方法。 0 1 GST pull-down实验原理 GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glut...
蛋白参与的交互作用,都会用到一个共同的实验原理,叫免疫共沉淀(Immunoprecipitation),即用一个蛋白的特异性抗体去沉淀这个蛋白,与它存在结合的其他分子会被一起沉淀下来,接下来对沉淀物里的其他分子进行鉴定,核酸就用测序,蛋白就用质谱,就能分析得到与特定蛋白存在交互的其他分子。 理解了co-IP,ChIP和RIP是类似的原理...
GST pull-down和CoIP有何区别?实验结果该如何解读? GST pull-down实验和CoIP实验原理是非常相似的!今天就简单介绍一下两者的异同,同时结合文献案例给大家分享一下CoIP和GST pull-down实验结果的分析方法。 01 GST pull-down实验原理 GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutath...
ChIP实验和Co-IP实验 ChIP实验和Co-IP实验 ChIP:（chromatinimmunoprecipitationassay,染色质免疫沉淀技术)真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在，目前可以研究体内DNA与蛋白质相互作用的主要方法。Co-IP:（Co-Immunoprecipitation,免疫共沉淀）确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的方法。Part1:ChIP DNA和蛋白质...
Co-IP实验质谱揭示蛋白质相互作用网络：启示生物药物研发和治疗策略 Co-IP实验质谱揭示蛋白质相互作用网络：启示生物药物研发和治疗策略 蛋白质相互作用是细胞中生物学过程的关键组成部分，对于疾病的发生和发展具有重要作用。为了全面了解蛋白质相互作用网络，并为生物药物研发和治疗策略提供准确的靶点信息，科学家们不断...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation),简称 Co-IP,其原理是当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来, 如果用蛋白质 X 的抗体 anti-X(通常称为 IP 抗体)将 X 特异地抓住并沉淀下来,那么与 X 在体内结合的蛋白质 Y 或者 Z 等也能共同被沉淀下来。目前多用 ...
ChIP实验和Co-IP实验 ChIP实验和Co-IP实验 ChIP:（chromatinimmunoprecipitationassay,染色质免疫沉淀技术)真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在，目前可以研究体内DNA与蛋白质相互作用的主要方法。Co-IP:（Co-Immunoprecipitation,免疫共沉淀）确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的方法。Part1:ChIP DNA和蛋白质...
样品的制备是CO-IP实验的关键步骤之一。确保样品的纯度和完整性对于获得可靠的结果至关重要。在制备样品时,应注意以下几点: 使用高质量的细胞提取缓冲液来裂解细胞并保持蛋白质的完整性。 添加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂来防止蛋白质的降解和磷酸化。 使用低温和快速的离心步骤来避免蛋白质的降解和聚集。