IB：全称immunoblotting，即免疫印迹，也就是常规的Western Blotting，用于显示目的蛋白。IP：全称immunoprecipitation，即免疫沉淀，这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input：全细胞裂解液，含有细胞内所有的蛋白，可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液，在做IP实验之前，需要先跑WB，确认样本中含有蛋白A和...
1、原理解析 说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理...
Co-IP实验标准操作全流程、实验结果图解读、实验常见问题分析&解决、实际应用场景等 ,一文帮助大家掌握免疫共沉淀技术。 如果有任何Co-IP实验问题,可以加福麦斯生物的Co-IP实验互助群,0广告,有技术老师还有很多热心的同学一起探讨! 一、Co-IP实验原理 1、原理解析 说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP...
CO-IP(免疫共沉淀)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 从原理示意图可见,免疫共沉淀利用抗原 (红三角) 与蛋白 (蓝圆柱) 的特异性结合,再通过连接着树脂的抗体 (紫圆球) 去识别抗原,从细胞裂解液或者蛋...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 其原理是如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
在上一个主题中,我们从原理、应用、实验流程及常见问题几个方面详细了解了染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch-IP)技术,本期我们继续为大家带来分子互作免疫沉淀相关实验——免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)的实验指南和常见问题解析。众
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用，是研究蛋白质互作的经典方法。特异性抗体...
Co-IP—验证蛋白互作的不二之选 蛋白互作在细胞生命活动中起着至关重要的作用，并在不同的时空层面上参与多种细胞活动，因此研究蛋白互作对于理解分子调控网络至关重要。而在植物中筛选到潜在的互作蛋白后，大多数情况下，获得表达两种蛋白的稳定转化植株费时又费力。在这种情况下，如果不需要非常严格地在植物体内研究...
3、准备Protein A agarose,用PBS 洗两遍珠子,然后用PBS配制成50%浓度,建议减掉枪尖部分,避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠。 4、裂解蛋白,收集的细胞中加入1000ul细胞裂解液10ul蛋白酶抑制剂,冰上静置30min,每10min震荡混匀一次,4℃,12000rpm离心10min,收集上清液。