为了利用AAV研究DGTM四因子（DNP63A、GRHL2、TFAP2A和MYC）在体内重编程能否诱导皮肤溃疡表面上皮组织新生，作者进行了皮下注射或直接将表达绿色荧光蛋白的AAV（GFP-AAV）注射于皮肤原位分离的溃疡来确定哪种AAV可以最高效感染。
三、TUBA1A：早期神经元特异性启动子 TUBA1A是α-微管蛋白基因，研究表明，TUBA1A主要在发育中的小鼠胚胎中枢神经系统和外周神经系统中高度表达，所以一般将TUBA1A作为早期神经元特异性启动子。Yumi等人用TUBA1A-Cre小鼠与Ikbkap-floxed小鼠杂交获得了Ikbkap基因条件性敲除小鼠，在胚胎期第17.5天时，在神经节细胞层和视...
在不含P40序列的GFP载体上也观察到类似的趋势,这表明P40元件的存在对用于生物筛选的上游串联启动子的调控几乎没有影响。由于TRACER结构缺乏全长rep序列,在病毒产生过程中,rep蛋白由单独的质粒来提供。 Fig5:C57BL/6小鼠TRACER文库NGS测序分析 依赖于Cre酶的病毒DNA定向进化策略可能会受到病毒产毒能力的影响,也会有检...
案例1：研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26...
另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、需要对动物进行造模，什么时间注射AAV合适？AAV的表达高峰在注射后3-4周，然后结合动物造模的时间、注射AAV的目的来推算注射时机。比如AAV调控基因表达进而起治疗作用，则一般要把控AAV的表达高峰期与...
载体：AAV-CaMKIIα-Cre-GFP &AAV-DIO-caspase-3 注射体积：两支病毒1:1混合注射100nl 观察时间：4周 1.5 海马、皮层&逆向非跨突触（rAAV2/retro）客户发表文章：Biological Psychiatry. (IF=11.984). Bing Xing Pan,et.al. (2018). Chronic stress causes projection-specific adaptation of amygdala ...
3. 局部注射。此外还可采用Cre依赖性基因开关（Cre-loxp系统），如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。Q5：AAV作为一种体内常用的工具病毒，可实现什么功能？1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体，注射到动物体内实现过表达。2. 基因干扰表达。将针对目的基因设计...
案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果...
另一方面,研究人员将表达Cre重组酶的AAV9直接注射到6周龄的Mcufl/fl小鼠胫骨前肌(TA)中,将成年小鼠肌肉组织Mcu特异性敲除。病毒转导后8周,与AAV9-GFP对照组相比,AAV9-Cre转导小鼠的TA肌肉裂解物中MCU蛋白水平显著降低,但未观察到TA肌肉重量的变化,也没有组织病理学表现,总之,这些结果表明,MCU依赖性Ca2+信号的...
此外还可采用Cre依赖性基因开关(Cre-loxp系统),如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。 AAV的表达效果能持续多久 AAV在细胞内主要是以环状的dsDNA附加体(circularised dsDNA episomes)的形式存在,而不会像慢病毒LV那样整合到宿主细胞的基因组。对于分裂不旺盛的细胞,如神经元...