通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除，理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果，一方面是本身编辑效率低，另一方面是体内无法做筛选，最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化，因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、...
AAV-LungX尾静脉注射肺脏转导(5E+11vg/只,左:小动物活体成像结果;右:荧光结果) AAV-LungX尾静脉注射Cdh5-CreERT2;R26RtdTomato鼠肺脏转导(1E+11vg/只,绿色:AAV-GFP;红色:Cdh5-tdT) 精准靶向肺ECs 肺内皮细胞的功能异常往往与许多肺部疾病有直接关系,数据显示,AAV-LungX表现出对于肺内皮细胞具有高度细胞...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除,理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果,一方面是本身编辑效率低,另一方面是体内无法做筛选,最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化,因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。 11、需要...
在不含P40序列的GFP载体上也观察到类似的趋势,这表明P40元件的存在对用于生物筛选的上游串联启动子的调控几乎没有影响。由于TRACER结构缺乏全长rep序列,在病毒产生过程中,rep蛋白由单独的质粒来提供。 Fig5:C57BL/6小鼠TRACER文库NGS测序分析 依赖于Cre酶的病毒DNA定向进化策略可能会受到病毒产毒能力的影响,也会有检...
案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果...
为了进一步研究这些启动子的心脏腔室特异性活性,研究人员采用Cre重组酶(Cre)双荧光报告基因小鼠(mT / mG)作为实验动物,转基因包含CAG启动子及其下游的Tomato(一种红色荧光蛋白)和GFP基因,示意图见图A。因此,每个mT / mG小鼠细胞都是Tomato阳性...
AAV-LungX尾静脉注射肺脏转导（5E+11vg/只，左：小动物活体成像结果；右：荧光结果）AAV-LungX尾静脉注射Cdh5-CreERT2;R26RtdTomato鼠肺脏转导（1E+11vg/只，绿色：AAV-GFP；红色：Cdh5-tdT）精准靶向肺ECs 肺内皮细胞的功能异常往往与许多肺部疾病有直接关系，数据显示，AAV-LungX表现出对于肺内皮细胞具有...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除,理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果,一方面是本身编辑效率低,另一方面是体内无法做筛选,最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化,因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。
接下来,该研究团队使用交叉标记策略来表达GFP和突触素-RFP 或 syp-RFP 在兴奋性或抑制性rVMM SPN 并检查其轴突投射和突触前末梢(syp-RFP)。通过光刺激麻醉小鼠中不同群体的下降脊髓投射神经元(SPN),发现刺激头端腹内侧延髓(rVMM)中的兴...
在使用AAV8-GCG-GFP转导至胰腺10天后，超过96%的胰高血糖素阳性α细胞具有GFP的表达。表明GCG启动子...