三、TUBA1A：早期神经元特异性启动子 TUBA1A是α-微管蛋白基因，研究表明，TUBA1A主要在发育中的小鼠胚胎中枢神经系统和外周神经系统中高度表达，所以一般将TUBA1A作为早期神经元特异性启动子。Yumi等人用TUBA1A-Cre小鼠与Ikbkap-floxed小鼠杂交获得了Ikbkap基因条件性敲除小鼠，在胚胎期第17.5天时，在神经节细胞层和视...
为了利用AAV研究DGTM四因子（DNP63A、GRHL2、TFAP2A和MYC）在体内重编程能否诱导皮肤溃疡表面上皮组织新生，作者进行了皮下注射或直接将表达绿色荧光蛋白的AAV（GFP-AAV）注射于皮肤原位分离的溃疡来确定哪种AAV可以最高效感染。
在不含P40序列的GFP载体上也观察到类似的趋势,这表明P40元件的存在对用于生物筛选的上游串联启动子的调控几乎没有影响。由于TRACER结构缺乏全长rep序列,在病毒产生过程中,rep蛋白由单独的质粒来提供。 Fig5:C57BL/6小鼠TRACER文库NGS测序分析 依赖于Cre酶的病毒DNA定向进化策略可能会受到病毒产毒能力的影响,也会有检...
案例1：研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26...
3. 局部注射。此外还可采用Cre依赖性基因开关（Cre-loxp系统），如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。Q5：AAV作为一种体内常用的工具病毒，可实现什么功能？1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体，注射到动物体内实现过表达。2. 基因干扰表达。将针对目的基因设计...
另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、需要对动物进行造模，什么时间注射AAV合适？AAV的表达高峰在注射后3-4周，然后结合动物造模的时间、注射AAV的目的来推算注射时机。比如AAV调控基因表达进而起治疗作用，则一般要把控AAV的表达高峰期与...
Roberta等人在研究常染色体隐性成骨不全症(OI)时,利用Runx2 启动子表达 Cre 重组酶成功移除 Tmem38b 基因的第 3 外显子,生产出了Tmem38b 成骨细胞特异性条件性基因敲除小鼠((Runx2Cre;Tmem38bfl/fl)。 CD11b基因编码的蛋白是整合素alpha M(ITGAM),是全髓系细胞的标志物,成熟髓样细胞系来源于骨髓中常见的髓...
载体：AAV-CaMKIIα-Cre-GFP &AAV-DIO-caspase-3 注射体积：两支病毒1:1混合注射100nl 观察时间：4周 1.5 海马、皮层&逆向非跨突触（rAAV2/retro）客户发表文章：Biological Psychiatry. (IF=11.984). Bing Xing Pan,et.al. (2018). Chronic stress causes projection-specific adaptation of amygdala ...
此外还可采用Cre依赖性基因开关(Cre-loxp系统),如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。 AAV的表达效果能持续多久 AAV在细胞内主要是以环状的dsDNA附加体(circularised dsDNA episomes)的形式存在,而不会像慢病毒LV那样整合到宿主细胞的基因组。对于分裂不旺盛的细胞,如神经元...
您是否在rAAV构建体中包含了报告基因,例如GFP或mCherry?能够通过荧光测量直接观察到病毒表达发生的位置。如果没有,您可以考虑在驱动您感兴趣的基因的同一启动子下共同注射携带报告基因的AAV,并测量报告基因表达作为您感兴趣的不易检测基因的代表。如果无法进行共表达或共感染,通过免疫组化或原位杂交检测目的蛋白可能是...