在不含P40序列的GFP载体上也观察到类似的趋势,这表明P40元件的存在对用于生物筛选的上游串联启动子的调控几乎没有影响。由于TRACER结构缺乏全长rep序列,在病毒产生过程中,rep蛋白由单独的质粒来提供。 Fig5:C57BL/6小鼠TRACER文库NGS测序分析 依赖于Cre酶的病毒DNA定向进化策略可能会受到病毒产毒能力的影响,也会有检...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除，理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果，一方面是本身编辑效率低，另一方面是体内无法做筛选，最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化，因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、...
Roberta等人在研究常染色体隐性成骨不全症(OI)时,利用Runx2 启动子表达 Cre 重组酶成功移除 Tmem38b 基因的第 3 外显子,生产出了Tmem38b 成骨细胞特异性条件性基因敲除小鼠((Runx2Cre;Tmem38bfl/fl)。 CD11b基因编码的蛋白是整合素alpha M(ITGAM),是全髓系细胞的标志物,成熟髓样细胞系来源于骨髓中常见的髓...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除,理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果,一方面是本身编辑效率低,另一方面是体内无法做筛选,最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化,因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。 11、需要...
案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除,理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果,一方面是本身编辑效率低,另一方面是体内无法做筛选,最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化,因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。
为了进一步研究这些启动子的心脏腔室特异性活性,研究人员采用Cre重组酶(Cre)双荧光报告基因小鼠(mT / mG)作为实验动物,转基因包含CAG启动子及其下游的Tomato(一种红色荧光蛋白)和GFP基因,示意图见图A。因此,每个mT / mG小鼠细胞都是Tomato阳性...
通过AAV利用Crispr/Cas9技术做在体敲除,理论上可以实现但实际上很难得到想要的结果,一方面是本身编辑效率低,另一方面是体内无法做筛选,最终得到的可能只是敲低的效果甚至是没有变化,因此风险很高。另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。
在眼部的应用研究中,Sonoda和他的团队利用AAV2研究一个非典型的抑制环路对非成像(潜意识)脑区光敏行为学的影响[17],使用AAV2/hSyn-FLEX-Chrimson-tdTomato载体在Gad2-IRES-Cre小鼠的玻璃体直接注射,玻璃体注射1-2个月后,切片进行免疫荧光,检测感染1-2个月后视交叉上核(SCN)、小叶(IGL)、腹侧膝状核(vLGN...
AAV-LungX尾静脉注射Cdh5-CreERT2;R26RtdTomato鼠肺脏转导(1E+11vg/只,绿色:AAV-GFP;红色:Cdh5-tdT) 精准靶向肺ECs 肺内皮细胞的功能异常往往与许多肺部疾病有直接关系,数据显示,AAV-LungX表现出对于肺内皮细胞具有高度细胞亲嗜性,精准靶向ECs,不感染ATII,对于ATI有少量感染。