通过尾静脉注射,研究人员将AAV-PHP.B携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的病毒变体注入小鼠体内,该病毒能够特...
三、TUBA1A:早期神经元特异性启动子 TUBA1A是α-微管蛋白基因,研究表明,TUBA1A主要在发育中的小鼠胚胎中枢神经系统和外周神经系统中高度表达,所以一般将TUBA1A作为早期神经元特异性启动子。Yumi等人用TUBA1A-Cre小鼠与Ikbkap-floxed小鼠杂交获得了Ikbkap基因条件性敲除小鼠,在胚胎期第17.5天时,在神经节细胞层和视...
为了进一步研究这些启动子的心脏腔室特异性活性,研究人员采用Cre重组酶(Cre)双荧光报告基因小鼠(mT / mG)作为实验动物,转基因包含CAG启动子及其下游的Tomato(一种红色荧光蛋白)和GFP基因,示意图见图A。因此,每个mT / mG小鼠细胞都是Tomato阳性...
案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果...
在不含P40序列的GFP载体上也观察到类似的趋势,这表明P40元件的存在对用于生物筛选的上游串联启动子的调控几乎没有影响。由于TRACER结构缺乏全长rep序列,在病毒产生过程中,rep蛋白由单独的质粒来提供。 Fig5:C57BL/6小鼠TRACER文库NGS测序分析 依赖于Cre酶的病毒DNA定向进化策略可能会受到病毒产毒能力的影响,也会有...
另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除,前提是必须要有flox动物,再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、需要对动物进行造模,什么时间注射AAV合适?AAV的表达高峰在注射后3-4周,然后结合动物造模的时间、注射AAV的目的来推算注射时机。比如AAV调控基因表达进而起治疗作用,则一般要把控AAV的表达高峰期与...
Description:AAV9-Syn-Cre-GFP is the serotype 9 AAV which express Cre recombinase fusion with GFP under the control of human Synapsin promoter. This product used in the Cre-lox system as a genetic tool to generate site-specific recombination of DNA between loxP sites in cultured cells and anim...
3. 局部注射。此外还可采用Cre依赖性基因开关(Cre-loxp系统),如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。Q5:AAV作为一种体内常用的工具病毒,可实现什么功能?1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体,注射到动物体内实现过表达。2. 基因干扰表达。将针对目的基因设计...
3. 局部注射。此外还可采用Cre依赖性基因开关(Cre-loxp系统),如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。 Q5:AAV作为一种体内常用的工具病毒,可实现什么功能? 1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体,注射到动物体内实现过表达。
载体:AAV-CaMKIIα-Cre-GFP &AAV-DIO-caspase-3 注射体积:两支病毒1:1混合注射100nl 观察时间:4周 1.5 海马、皮层&逆向非跨突触(rAAV2/retro)客户发表文章:Biological Psychiatry. (IF=11.984). Bing Xing Pan,et.al. (2018). Chronic stress causes projection-specific adaptation of amygdala ...