研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果显示这...
1. AAV可以用来构建眼科相关疾病的疾病模型 案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 week...
发现病毒能驱动94%的内皮细胞发生基因重组。 使用AAV-BI30对脑血管内皮细胞进行功能研究,Caveolin-1(Cav1,小窝蛋白)在维持神经血管耦合、维持血脑屏障中具有重要作用。在Cav1-loxp小鼠使用AAV-BI30的cre病毒进行重组,发现AAV-BI30能显著降低血管内皮细胞的Cav1的表达,但不会影响非血管内皮细胞的Cav1的表达。 以上...
相比于单个载体维真生物提供的依赖Cre的反式剪接系统的表达效率约20%。 图5. 维真生物提供依赖Cre的反式剪接系统示意图 图6. 维真生物的依赖Cre的反式剪接系统实验图 三.维真生物 Cre-loxP重组系统AAV操作方法 (一)体外实验 以2型AAV病毒为例,维真生物为您推荐的MOI值104-105,是根HEK293细胞得出的数据,不同...
另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、需要对动物进行造模，什么时间注射AAV合适？AAV的表达高峰在注射后3-4周，然后结合动物造模的时间、注射AAV的目的来推算注射时机。比如AAV调控基因表达进而起治疗作用，则一般要把控AAV的表达高峰期与...
病毒编码序列的完全去除使重组AAV载体的包装能力达到最大化（包装容量为4.5 Kb），并且可以更好地保证它们在体内递送时的低免疫原性和细胞毒性。结合组织特异性启动子、多种报告基因、Cre重组酶等技术，重组AAV载体可以高效介导外源基因的特异性表达；此外通过携带光遗传学、化学遗传学、钙指示剂及神经递质荧光探针等...
南模生物利用AAV介导的Cre-flox系统构建了丰富的动物模型,部分验证数据如下: 小鼠肺癌模型 由气管雾化注射AAV-Cre病毒至KL小鼠(NM-CKO-234719)肺部,使Cre在小鼠肺部特异性表达,诱导Stk11表达缺失与Kras-G12D突变,可诱发肺癌发生。 小鼠PKD运动障碍模型
Cre-Loxp AAV应用场景 场景一:构建动物模型 构建条件性敲除/过表达小鼠模型通常是通过两种转基因动物(一种带Cre,一种带loxP序列)进行至少2代杂交获得,耗时较长,成本较高。但使用腺相关病毒(AAV),通过Flox小鼠注射AAV-Cre或者Cre小鼠注射AAV-LoxP的方式,周期短,成本低,时空特异性表达,可以极大的提高转基因小鼠模...
长久以来，Ben Deverman 实验室一直专注于为“下一代”基因疗法设计更好的病毒载体，包括利用蛋白质工程、体内高通量筛选以及机器学习等多种方法开发一种可以快速筛选 AAV 载体的技术，开发更安全高效的新型 AAV 载体。2013 年，他与合作者开发了一种称之为基于 Cre 重组酶的靶向进化（CREATE）的AAV筛选方法，可以在...
病毒类型:AAV8-UCP1-eGFP, AAV8-UCP1-iCre 部位:棕色脂肪细胞(Atg5Flox/ Flox mice) 注射方法:尾静脉注射;5x10E+11 genomic copies/只 图6 BAT特异性自噬抑制 4. Myf5前体脂肪细胞特异性启动子 肌原性因子5(Myf5),Myf5 Cre细胞系已被用于生成早期缺失相关基因的模型,以用于研究棕色脂肪的发育和功能[6]。