7、AAV感染动物后，为什么会观察不到荧光或荧光微弱？这里除了要关注问题6的因素外，还要考虑荧光蛋白的特性，例如荧光蛋白的亮度、稳定性等。制作组织切片过程中使用的有机溶剂有可能会改变荧光蛋白的结构，导致荧光淬灭；GFP在酸性环境中易淬灭。8、石蜡组织切片能直接观察荧光来看感染效率吗？不可以。虽然石蜡切片能...
注射CMV(巨细胞病毒启动子)介导GFP表达的AAV时,会发现GFP在整个胰腺中表达。 3、AAV感染胰腺的注射方式 目前AAV感染胰腺的方式目前有两种,一种是通过胆管将病毒注射入胰腺,另一种是腹腔注射感染胰腺。其中通过胆管感染需要用微夹钳夹住胆胰管的近肝端和近十二指肠端,然后用泵将病毒注入胆管感染胰腺;而腹腔注射的...
AAV）属于微小病毒科( parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒。
Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。 LoxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,反向重复序列是Cre重组酶的特异识别位...
3. 局部注射。此外还可采用Cre依赖性基因开关（Cre-loxp系统），如用特异性启动子含cre酶的AAV注射Loxp小鼠实现特定组织或细胞目的基因的敲除。Q5：AAV作为一种体内常用的工具病毒，可实现什么功能？1. 基因过表达。将目的基因的CDS区构建到AAV载体，注射到动物体内实现过表达。2. 基因干扰表达。将针对目的基因设计...
Product Category:Pre-made recombinant AAV; AAV-Synapsin-Cre-GFP; AAV9-Synapsin-Cre-GFP (Cre fusion with GFP) Description:AAV9-Syn-Cre-GFP is the serotype 9 AAV which express Cre recombinase fusion with GFP under the control of human Synapsin promoter. This product used in the Cre-lox syste...
接下来,该研究团队使用交叉标记策略来表达GFP和突触素-RFP 或 syp-RFP 在兴奋性或抑制性rVMM SPN 并检查其轴突投射和突触前末梢(syp-RFP)。通过光刺激麻醉小鼠中不同群体的下降脊髓投射神经元(SPN),发现刺激头端腹内侧延髓(rVMM)中的兴...
您是否在 rAAV 构建体中加入了报告基因,例如GFP 或 mCherry?这些将使通过荧光测量直接观察表达发生的位置变得容易。如果没有,您可以考虑共同注射一个 AAV,该 AAV 在驱动您感兴趣的基因的同一启动子下携带一个报告基因,并测量报告基因表达作为您感兴趣的基因的代理,这可能不容易检测。如果共表达或共感染是不可能的...
问题1:这篇Cell论文指出大量NeuroD1诱导的mCherry阳性神经元与GFP事先标记的内源性神经元重合,出现这种现象的原因是什么?陈功:这主要是因为他们用了高滴度1-2×10E13GC/mL,1μl 体积的AAV病毒,对大脑组织产生了损伤,引起了神经元泄漏。我们团队也已经用这样的高滴度AAV,证实了注射高滴度AAV产生的毒性。事实上...
一种可能的替代方案是将TK-GFP包装的病毒衣壳引入目标区域。吞噬TK-GFP AAV的巨噬细胞将发光并表达报告基因。利用B细胞和T细胞上的细胞表面受体也可以通过TK-GFP AAV转导,从而在体内定量淋巴细胞。促进巨噬细胞的吞噬作用或操纵淋巴细胞特异性的细胞受体可以定量先天性的和/或获得性的免疫应答。最终,生物材料的测试...