案例1：研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26...
为了筛选出能穿透血脑屏障并在整个中枢神经系统中有效转导的AAV血清型,研究者将衣壳文库静脉注射到成年GFAP-Cre小鼠中,这些模式小鼠能够特异性在星形胶质细胞中表达Cre。一周后,从脑和脊髓组织中分离DNA,并设计引物,对有Cre介导重组的恢复衣壳序列顺序的基因组进行PCR扩增。 研究者将整个cap文库克隆到rAAV-cap-in-c...
一个具有代表性的例子是在CNS星形胶质细胞中起作用的的 2.2 kb 人神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 启动子及其681 bp缩短版本的 gfaABC1D启动子。后者表现出与全长 GFAP 启动子相同的表达模式,甚至比全长 GFAP 启动子的活性高了 2 倍(图4)。此外,一些肌肉特异性...
109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果显示这项技术对于建立短期的疾病模型用于研究青光眼以及视神经相关疾病具有很好的应用价值。 图1 用于治疗遗传性视网膜疾病的基因治疗方法...
AAV-GFAP-GFP (Serotype 5) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 SL101520 AAV-GFAP-mCherry (Serotype 5) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 SL101539 AAV-CAG-Luc (Serotype 5) >1x10^13 VG/mL 30 µL $168 ~ $488 ...
明亮信号示出了GFP蛋白的表达。数据代表每组2只(AAV-PHP.B)和3只(AAV-PHP.B2和AAV-PHP.B3)小鼠。图9B示出了从GFAP-Cre筛选中回收的个体变体的制备中得到的DNA酶抗性vg的量。产量以每150mm培养皿生产细胞的纯化的载体基因组拷贝的数量给出;平均值+/-s.d.*p<0.05,单向ANOVA和Tukey多重比较检验。柱中...
用不同CRB构建体(例如,CRB1、sCRB1、CRB2同种型1、CRB2同种型2、CRB2同种型3、CRB3或其修饰版本等)之一和对照GFP构建体(Aartsen等人,(2010)PLoSOne5:e12387;GFAP-driventransgeneexpressioninactivatedMüllerglialcellsfollowingintravitrealinjectionofAAV2/6vectors;UniProtKB/Swiss-Prot序列P42212)使用磷酸钙法(...
腺相关病毒 (Adeno-AssociatedViralVector,AAV)简介 腺相关病毒属微小病毒科(parvovirus),为无包膜的单链线状DNA 病毒。AAV的基因组约4700bp, 包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145个核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。 1. 安全性高 4. 长时程表达稳定 AAV病毒特点 2. 免疫原性低 5. 物...
腺相关病毒 (Adeno-AssociatedViralVector,AAV)简介 腺相关病毒属微小病毒科(parvovirus),为无包膜的单链线状DNA 病毒。AAV的基因组约4700bp, 包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145个核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。 1. 安全性高 4. 长时程表达稳定 AAV病毒特点 2. 免疫原性低 5. 物...
AAV是一种不致病的病毒，与人体免疫系统相容性好，因此在临床应用中具有较高的安全性。在眼科领域，AA...