STEP 03将查询的基因放大到最大页面,以便我们观察;如下图所示,红色方框内就是该基因的所有T-DNA插入信息(每个T-DNA插入都有具体的名字,如SALK_***),我们在选择T-DNA插入类型的时候尽量避开和其它基因相邻的T-DNA插入(也就是被红色框穿过的T-DNA插入),同时尽量选择外显子上的T-DNA插入(绿色粗实线代...
T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代).
对于T-DNA插入型突变体的鉴定可以通过三引物法来实现。 2 三引物法鉴定突变体的原理 2.1 关于Ti质粒和T-DNA Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象,将Ti质粒...
实验十、模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 下载积分: 200 内容提示: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 文档格式:PPT | 页数:22 | 浏览次数:17 | 上传日期:2024-03-07 08:38:52 | 文档星级: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 阅读...
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为后者产...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后...
拟南芥突变tdna插入pcr鉴定 拟南芥TDNA 插入突变体ATSUC3 的PCR 鉴定 拟南芥是一种常见的模式植物,广泛应用于植物遗传学和分子生物学 研究中。TDNA 插入突变体是拟南芥突变体中的一种重要类型,它们 具有基因敲除或敲低表达的作用,有助于揭示基因的功能和作用机制。 ATSUC3 是拟南芥中的一个TDNA 插入突变体,具有...
【题目】(1)拟南芥突变体库的构建过程如下。①将插入了氨苄青霉素抗性基因的T-DNA与农杆菌在液体培养基中振荡培养,获得转化液。将转化液稀释后对野生型拟南芥进行转化,继续培养拟南芥植株并收获其种子,再将种子放入含有的培养基中培养筛选出能正常萌发的种子,命名为F代种子。F代种子因插入了含有氨苄青霉素抗性基因的T...
本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩增目的基因扩增...