解:(1)研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中,T-DNA是农杆菌质粒的组成,所以种植野生型拟南芥,将地上部分浸入农杆菌悬浮液中以实现转化,该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子。(2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T1代植株基因型为杂合子,自交后所结种子中具有抗除草剂性状...
(6)T-DNA存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的DNA中.DNA连接酶可将不同的DNA片段进行连接.因为DNA两条链反向平行,由图示环状DNA外侧链DNA合成方向可判断,DNA扩增过程所选的引物应为B、C,这样可确保被插入的基因片段得到复制.要注意DNA两条单链反向平行,B、C作为引物可保证插入的基因片段优先复制.故答案为:(1)...
解:A、Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上的过程发生基因重新组合,使得植物细胞具有T-DNA上的基因,该变异属于基因重组,A正确;B、与野生型相比,含该基因的突变体对重金属镉(Cd)胁迫抗性明显增加,说明突变体根细胞膜对Cd2+吸收减少,说明该基因编码的不是Cd2+吸收转运载体蛋白质,B错误;C、T-DNA又称为“可转移...
⏺ T—DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T—DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为Tl 代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,...
【题目】(1)拟南芥突变体库的构建过程如下。①将插入了氨苄青霉素抗性基因的T-DNA与农杆菌在液体培养基中振荡培养,获得转化液。将转化液稀释后对野生型拟南芥进行转化,继续培养拟南芥植株并收获其种子,再将种子放入含有的培养基中培养筛选出能正常萌发的种子,命名为F代种子。F代种子因插入了含有氨苄青霉素抗性基因的T...
利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入信息,其过程如下:STEP 01打开网站;STEP 02在箭头指的红色框内输入想要查询的基因号,比如:AT2G***,输入之后点Search,得到如下页面,箭头指的红色框就是我们查询的基因,点击箭头指的蓝色框内的蓝色三角形按钮可以进行放大和缩小;STEP 03将查询的基因放大到最大页面,以...
最近从别的老师那里拿到了拟南芥的突变体种子,突变体的名称是SAIL_244_D02,这是一个T-DNA插入导致拟南芥基因CBF3沉默的突变体种子。因为大实验室中拟南芥的种子非常多,存在弄混的可能且需要鉴定种子是杂合体还是纯合体。所以在做后续的实验之前,必须要对突变体种子进行鉴定。对于T-DNA插入型突变体的鉴定可以通过三引...
1.Ti质粒和T-DNA ▪Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象,将Ti质粒进行改造,将感兴趣的基因放进T-DNA区段中,通过农杆菌侵染植物细胞,实现外源基因...
tail-pcr),进行了抗性相关基因的研究.通过tail-pcr技术,获得了拟南芥t-dna插入侧翼序列,利用拟南芥基因组全测序的优势,通过ncbi进行序列的同源性比对找到相应的基因.结果发现,tail-pcr可以有效地扩增t-dna插入侧翼拟南芥基因组序列,ad1,ad2,和ad4是最佳随机引物.对8个tail-pcr特异产物测序分析,证明3个t-dna插入在...