拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后...
(2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T1代植株基因型为杂合子,自交后所结种子中具有抗除草剂性状的占,继续种植具有抗除草剂性状的种子,长成植株后进行自交,若全部具有抗除草剂性状或没有性状分离,表明获得了纯合的转基因突变体植株Y。(3)检测扩增结果中,若“LB+RP”组合和“LP+RP”组合均能进行PCR扩增,...
在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2...
突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列；2.T-DNA插入方向确实定；3.T-DNA插入位置确实定；4.引物设计；5.PCR扩增；6.电泳检测。T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入方向 实验设计 T-...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DNA,转移DNA(transferred DNA),是根瘤农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定09生工吴超200900140129一、实验原理T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡那霉素...
▪1.学习用PCR方法检测生物遗传差异；▪2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理。2021/10/10 2 二、实验原理 1.Ti质粒和T-DNA ▪Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒，该质粒上有一段特殊的DNA区段，当农杆菌侵染植物细胞时，该DNA区段能自发转移，插入植物染色体DNA中，Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-...
反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上通过对靶基因进行必要的加工和修饰如定点突变基因插入缺失基因置换等再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组让其装配出具有生命活性的个体研究生物体基因组的结构与功能以及这些修饰可能对生物体的表型性状有何种影响等方面的内容 拟南芥T-DNA基因插入突变鉴定 ...
1 知乎:三引物法鉴定T-DNA插入突变体 https://zhuanlan.zhihu.com/p/377200556 2 LP RP 引物设计网站: T-DNA Primer Design http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 3 简书: 拟南芥突变体信息查询 https://www.jianshu.com/p/db695e0756ba...