拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩增目的基因扩增...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定09生工吴超200900140129一、实验原理T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡那霉素抗...
突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列;2.T-DNA插入方向确实定;3.T-DNA插入位置确实定;4.引物设计;5.PCR扩增;6.电泳检测。T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入方向 实验设计 T-...
▪1.学习用PCR方法检测生物遗传差异;▪2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理。2021/10/10 2 二、实验原理 1.Ti质粒和T-DNA ▪Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-...
插入诱变(insertionalmutagenesis),即将外源DNA随机插 入到拟南芥基因组中,获得突变体。当外源DNA“击中”某一基因时,这个特定基因就被关闭。农杆菌转化法:Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移...
拟南芥T-DNA插入突变 拟南芥T—DNA插入突变体的鉴定 精品ppt课件 1 1、反向遗传学 经典遗传学:由表及里,即通过杂交等手段观察表型性状的变化而推知遗传基因的存在与变化。表型—基因 反向遗传学:由里及表,即通过DNA重组等技术有目的地、精确定位地改造改造基因的精细结构以确定这些变化对表型性状的直接影响。
1、 拟南芥t-dna插入突变体的鉴定摘要:我们用ctab法提取拟南芥的t-dna插入突变体的dna,然后用三引物法进行pcr和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。关键字:拟南芥 t-dna插入突变 突变体的鉴定前言: 拟南芥 拟南芥是十字花科的植物,它是植物...