拟南芥T-DNA插入突变纯合体的鉴定 拟南芥T-DNA插入突变纯合体的鉴定余振洋（高山山、潘红芳）、09级生技1班、200900140156、2011/12/14 摘要本实验通过CTAB法提取目的拟南芥的DNA，再用三引物法PCR扩增所需的目的基因后，用电泳检测该拟南芥是否为转基因的拟南芥，并判断其是纯合突变还是杂合突变。关键词拟南芥;T-D...
在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2...
解:(1)研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中,T-DNA是农杆菌质粒的组成,所以种植野生型拟南芥,将地上部分浸入农杆菌悬浮液中以实现转化,该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子。(2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T1代植株基因型为杂合子,自交后所结种子中具有抗除草剂性状...
3.用PCR方法鉴定T-DNA插入纯合突变体 ▪农杆菌Ti质粒转化植物细胞后，在获得的后代分离群体中，有T-DNA插入的纯合突变体，杂合突变体，和野生型。在突变体研究中，需要的材料是纯合突变体，所以必须从分离群体中将纯合突变体鉴定出来。▪PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP，其中...
T-DNA插入突变体鉴定方法主要有两种：三引物法和双引物法。在本实验中使用三引物法。三引物法的原理如图1所示，即采用三引物（LP、RP、BP）进行PCR扩增。野生型植株目的基因的两条染色体上均未发生T-DNA插入，所以其PCR产物仅有1种，分子量约900bp（即从LP到RP）；纯合突变体植株目的基因的两条染色体上均发生T...
应用两种植物T-DNA插入突变体PCR鉴定方法,即"三引物法"和"双引物法"对拟南芥T-DNA插入突变体atsuc3(目的基因两条染色体均发生T-DNA插入的纯合突变体)进行鉴定和比较的结果表明,"三引物法"由于易产生非特异性扩增而无法得到PCR鉴定结果,从而导致鉴定失败;"双引物法"则可避免此种现象,得到可靠、有效的鉴定结果. ...
拟南芥 T-DNA 插入突变纯合体的鉴定 余振洋(高山山、 潘红芳)、 09 级生技 1 班、 200900140156、 2011/12/14 摘要 本实验通过 CTAB 法提取目 的拟南芥的 DNA, 再用三引物法 PCR 扩增所需的目 的基因后, 用电泳检测该拟南芥是否为转基因的拟南芥, 并判断其是纯合突变还是杂合突变。 关键词 拟南芥; T-...
PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
姓名**系年级 学号 日期科目遗传学实验 题目模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定摘要:农杆菌Ti质粒转化植物细胞后,在获得的后代分离群体中,有T-DNA插入的纯合突变体,杂合突变体,和野生型。在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体...