拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代). (1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ...
PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
十三模式植物拟南芥T-DNA插入-突变体的PCR鉴定 实验目的：-■1.学习用PCR方法检测生物遗传差异；-2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理 二、实殓原理-1.Ti质粒和T-DNA-T质粒是土壤农杆菌的天然质粒，该质粒上有一段特殊的-DNA区段，当杆菌侵染植物细胞时，该DNA区段能自-发转移，插入植物染色体DNA中，Ti质粒...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
1、拟南芥TDNA插入突变体的鉴定实验目的1. 熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2. 掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突 变体的方法。DNA插入鉴定的原理LBa LBbpZone Exl5 Max N Ext3 pZone突变体鉴定的步骤1. T-DNA插入基因的基因组序列;2. T-DNA插入方向的确定;3. T-DNA插入位置的确定;4. 引物设计;...
拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定 实验设计的思路和原理 经典遗传学 是从生物的性状、表型到遗传物质来 研究生命的发生与发展规律。一般是随机突变基因，从表型变化入手去研究和确定基因的遗传规律、结构特征、在染色体上的位置，并克隆基因的序列。反向遗传学 则是在获得生物体基因组全部序列的 基础上，通过对靶基因...
模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定摘要:通过本次实验,了解了拟南芥T-DNA插入突变体鉴定的原理,掌握了DNA提取技术、PCR技术以及电泳鉴定技术,对拟南芥的基因型做出判断。实验首先提取拟南芥的DNA,将获得的DNA进行PCR扩增,将扩增好的DNA加入上样缓冲液后与DNAmarker一起进行电泳,用凝胶成像系统对凝胶进行处理,可以看到...