拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
十三模式植物拟南芥T-DNA插入-突变体的PCR鉴定 实验目的：-■1.学习用PCR方法检测生物遗传差异；-2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理 二、实殓原理-1.Ti质粒和T-DNA-T质粒是土壤农杆菌的天然质粒，该质粒上有一段特殊的-DNA区段，当杆菌侵染植物细胞时，该DNA区段能自-发转移，插入植物染色体DNA中，Ti质粒...
T﹣DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T﹣DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代).(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除___,因为后者...
由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DNA,转移DNA(transferred DNA),是根瘤农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物基因组。人们将目的基因插入到经过改造...
1、拟南芥拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定插入突变体的鉴定 实验目的实验目的1熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突变体的方法。 T-DNA插入鉴定的原理突变体鉴定的步骤1. T-DNA插入基因的基因组序列;2. T-DNA插入方向的确定;3. T-DNA插入位置的确定;4. 引物设计;5. PCR扩...
模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定摘要:通过本次实验,了解了拟南芥T-DNA插入突变体鉴定的原理,掌握了DNA提取技术、PCR技术以及电泳鉴定技术,对拟南芥的基因型做出判断。实验首先提取拟南芥的DNA,将获得的DNA进行PCR扩增,将扩增好的DNA加入上样缓冲液后与DNAmarker一起进行电泳,用凝胶成像系统对凝胶进行处理,可以看到...
打开的页面如下:点击点击T-DNA Express:输入基因名称输入基因名称AT1G69120,点击,点击search:82012.11.28查找基因查找基因AT1G69120从上述窗口中可以获得很多从上述窗口中可以获得很多不同的突变体,专找不同的突变体,专找SALK_冠名的那些,获得冠名的那些,获得比较方便且便宜,有利于插比较方便且便宜,有利于插入突变体...