拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2...
由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DNA,转移DNA(transferred DNA),是根瘤农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物基因组。人们将目的基因插入到经过改造...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定09生工吴超200900140129一、实验原理T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡那霉素抗...
拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定 2012.11.28 1 实验设计的思路和原理 经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研 究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是是在获得生物体基因组全部序列的 基础上，通过对靶基因进行必要的加工和修饰，如定点突变、基因插入\缺失、基因置换等，再按组成顺序构建含生物体必需元件...
1、 拟南芥t-dna插入突变体的鉴定摘要:我们用ctab法提取拟南芥的t-dna插入突变体的dna,然后用三引物法进行pcr和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。关键字:拟南芥 t-dna插入突变 突变体的鉴定前言: 拟南芥 拟南芥是十字花科的植物,它是植物...
模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定摘要:通过本次实验,了解了拟南芥T-DNA插入突变体鉴定的原理,掌握了DNA提取技术、PCR技术以及电泳鉴定技术,对拟南芥的基因型做出判断。实验首先提取拟南芥的DNA,将获得的DNA进行PCR扩增,将扩增好的DNA加入上样缓冲液后与DNAmarker一起进行电泳,用凝胶成像系统对凝胶进行处理,可以看到...
1．熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法；2．掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突变 体的方法。实验材料 ❖野生型（Col）、ibm1突变体（SALK_023533）拟南芥植株 ❖IBM1(AT3G07610)是拟南芥中组蛋白修饰酶的编码基因，能影响植物的诸多的发育和生殖过程。ibm1突变体：开花延迟叶片卷曲果荚短小 花粉粒败育 ...