本次实验目的在于了解拟南芥T-DNA插入突变体鉴定的原理,掌握DNA提取技术、PCR技术以及电泳鉴定技术,对拟南芥的基因型做出判断。关键词T-DNA插入突变体拟南芥 PCR 琼脂糖凝胶电泳 1.引言 1.1遗传研究途径 (1)正向遗传学研究 杂交或诱变→表型观察→遗传规律→确定存在的基因及数目→基因的功能及作用性质。(2)...
STEP 03将查询的基因放大到最大页面,以便我们观察;如下图所示,红色方框内就是该基因的所有T-DNA插入信息(每个T-DNA插入都有具体的名字,如SALK_***),我们在选择T-DNA插入类型的时候尽量避开和其它基因相邻的T-DNA插入(也就是被红色框穿过的T-DNA插入),同时尽量选择外显子上的T-DNA插入(绿色粗实线代...
T—DNA插入突变最大的用处是构建突变体库,在此基础上构建侧翼序列库;目前在拟南芥中已经建立了接近饱和的T—DNA插入突变体库,该突变体库包含超过225000个独立的T—DNA插入株系,在预测的29454个基因中有21700个基因发生了插入突变[6]。含T~DNA激活标签的拟南芥群体已经获得,并且在这些群体中已经获得大量的异常...
拟南芥T-DNA插入突变 拟南芥T—DNA插入突变体的鉴定 1、反向遗传学 经典遗传学:由表及里,即通过杂交等手段观察表型性状的变化而推知遗传基因的存在与变化。表型—基因 反向遗传学:由里及表,即通过DNA重组等技术有目的地、精确定位地改造改造基因的精细结构以确定这些变化对表型性状的直接影响。基因—表型 1、...
1、 拟南芥t-dna插入突变体的鉴定摘要:我们用ctab法提取拟南芥的t-dna插入突变体的dna,然后用三引物法进行pcr和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。关键字:拟南芥 t-dna插入突变 突变体的鉴定前言: 拟南芥 拟南芥是十字花科的植物,它是植物...
模式植物拟南芥t讲课稿.pdf,遗传学实验 山东大学 生命科学学院 13 级临八 模式植物拟南芥 T-DNA插入突变体的鉴定 摘要 当农杆菌侵染植物细胞时,土壤农杆菌的天然质粒— Ti 质粒上 T-DNA 区段能自发转 移进植物细胞,并插入染色体 DNA中。拟南芥的 T-DNA 插入变异是反向遗传
实验首先提取拟南芥的DNA,将获得的DNA进行PCR扩增,将扩增好的DNA加入上样缓冲液后与DNAmarker一起进行电泳,用凝胶成像系统对凝胶进行处理,可以看到大小不同的DNA条带分离。通过这种方法鉴定出拟南芥是否为突变体。 关键词:T-DNA插入突变体、DNA提取、PCR、电泳鉴定、凝胶成像系统 1.前言 拟南芥作为生物学研究的模式...
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农
最近从别的老师那里拿到了拟南芥的突变体种子,突变体的名称是SAIL_244_D02,这是一个T-DNA插入导致拟南芥基因CBF3沉默的突变体种子。因为大实验室中拟南芥的种子非常多,存在弄混的可能且需要鉴定种子是杂合体还是纯合体。所以在做后续的实验之前,必须要对突变体种子进行鉴定。对于T-DNA插入型突变体的鉴定可以通过三引...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定.docx,拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 摘要:我们用CTAB法提取拟南芥的T-DNA插入突变体的DNA,然后用三引物法进行PCR和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。 关键字:拟南