THP1的慢病毒感染 4.提前4-5天复苏THP1,不要临时抱佛脚提前1天复苏,这样的状态不太行。细胞状态好的THP1是感染成功的关键。THP1复苏后把它丢在一边不要管他,笔者一般加6ml 1640全培。这里有个细节,水浴锅解冻后直接加入1640培基中,不要再去离心去除冻存液然后重悬这个操作了,THP1 不喜欢反复离心。 等到第4...
1.实验目的:THP-1慢病毒感染(CRISPR-Cas9体系,两步法)。第一步,LentiCas9慢病毒感染,让WT THP-1表达Cas9蛋白,通过Blasticidin(BSD)加压筛选;第二步,LentiGuide慢病毒感染,让THP-1(表达Cas9)表达sgRNA,通过Puromycin(Puro)加压筛选,从而得到目的基因敲除的THP-1 KO细胞株。 2.实验结果:得到表达Cas9的THP-1工具株...
5. 功能研究结果油红O染色结果显示，FNDC5过表达转染的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中的脂质蓄积减少，提示FNDC5在调节脂质代谢和炎症反应中可能发挥重要作用。讨论 本研究成功构建了FNDC5基因的过表达慢病毒载体，并通过该载体实现了FNDC5在THP-1细胞中的高效稳定表达。功能研究表明，FNDC5过表达可减少THP-1巨噬细胞...
THP-1转染慢病毒的MOI较高,而且THP-1状态较敏感,有很多难点,想请大神来指点一下 我仅发表一下我的技巧:1.THP-1需要提前铺板2-3天 2.降低嘌呤霉素浓度本帖完毕 1 如果您觉得本站好用,欢迎不吝分享: 回帖 提交评论 等待你,消灭零评论我的文献求助列表 发布帖子 一分钟了解求助规则 | 捐赠本站 | 历史...
这里有一点要注意:THP1感染慢病毒后可能已经不喜欢正常培基了。我试过初次筛杀之后用正常培基VS 嘌呤霉素培基培养,发现还是在嘌呤霉素的培基上它会疯狂长。所以这个细胞可能已经适应了这个环境,如果你的细胞不长,不妨试试加一些嘌呤霉素哦,可能它就会疯狂长啦! 希望这些小技巧能帮到大家!如果还有什么问题,欢迎随时...
携带有绿色荧光蛋白的 LILRB5慢病毒感染单 核 细胞系 THP-1在荧光显微镜下检测 到绿色荧光。 流 式细胞术检测显示,经稳定传代的 THP-1细胞系 EG- FP 的表达持续显著增强,表明 pHR-LILRB5慢病毒 转染的 THP-1 细胞,稳定表达 LILRB5,持续传代不 会影 响 LILRB5 的表达水平,LILRB5 稳定转染的 THP-1细胞系...
构建慢病毒表 达载体 pHR— L IL RB5, 与 p8. 91 和 pMD 共 同转入 293T 细胞 ,产生 标记有绿色荧光 的 L ILR B5 慢病毒 , 感染 单核细胞系 T HP一 1后 通过流式细胞 术检测 L IL RB5 的表达 。 示真核表达 载体 pE G FP— L ILR B5一 flag 的序列与预期相 符, 瞬时转染 pE GFP -L...
thp-1细胞用慢病毒(Lentivirus)还是腺病毒(Adenovirus)感染效果好? By 汉恒-杨燕 at 2020-07-28 • 0 人收藏 • 7205 人看过 thp-1细胞用慢病毒(Lentivirus)还是腺病毒(Adenovirus)感染效果好? 登录后方可回帖 登录 忘记密码 微信账号登录 现在注册 我要提问我来回答 标签广场 查看更多 腺相关病毒AAV...
我们前期研究发现蛇毒sPLA2结构上与人sPLA2高度相似,具有相同的结构域,因此蛇体内的sPLA2抑制剂(sPLA2 inhibitor,PLI)很有可能具有抗人sPLAa-AA炎症途径作用.本文在华游蛇中克隆了一个PLIγ新基因,并构建慢病毒载体pGCSIL-GFP-PLIγ.将重组病毒感染人单核巨噬细胞(THP-1),通过荧光显微镜观测GFP表达量... 查看...