2.4 转染THP-1细胞系将获得的重组慢病毒转染THP-1细胞系，采用威尼德电穿孔仪进行电穿孔转染，以提高转染效率。转染后48小时，荧光显微镜观察并计算转染效率。通过嘌呤霉素筛选，建立FNDC5过表达的稳定转染细胞系。2.5 检测FNDC5表达情况将稳定转染的THP-1细胞系分为三组：空白组、空载组和FNDC5组。采用Western
THP-1转染慢病毒的MOI较高,而且THP-1状态较敏感,有很多难点,想请大神来指点一下 我仅发表一下我的技巧:1.THP-1需要提前铺板2-3天 2.降低嘌呤霉素浓度本帖完毕 1 如果您觉得本站好用,欢迎不吝分享: 回帖 提交评论 等待你,消灭零评论我的文献求助列表 发布帖子 一分钟了解求助规则 | 捐赠本站 | 历史...
LILRB5的重组 慢病毒上清,收集含慢病毒颗粒的细 胞上清液,用0.45μm 滤器过滤上清液以去除所有细 胞及碎片,将 THP-1 细胞加入含病毒上清中 ,使 细胞 浓度为 5×105/ml,转染 48h 后更换为完全培养基, 继续培养 24h,收集 THP-1 细胞,利 用流式细胞术检 测 LILRB5-EGFP 在稳转细胞系 THP-1的表达。