一、siRNA设计 小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA)是一段长度在20-25个核苷酸之间的RNA双链,其生物应用较多,目前主要用于干扰RNA,达到调节基因表达(敲减)的目的,其本质是siRNA和相应的mRNA特异性结合、降解,继而实现阻滞mRNA继续翻译的目的。 设计原则: 1.siRNA序列不宜过长,超过30nt易导致其与其他mRNA非特异...
一、siRNA设计 小干扰RNA(siRNA)作为一段长度介于20至25个核苷酸的双链RNA,被广泛应用于生物学领域。其主要功能是干扰RNA,通过与特定mRNA的特异性结合和降解,从而实现对基因表达的调控(即基因敲减)。其核心机制在于阻止mRNA的进一步翻译。设计siRNA时,需要遵循以下原则:首先,要确保所选的siRNA序列与目标mRNA具...
设计原则:siRNA序列的长度不宜过长,超过30个核苷酸可能导致与其他mRNA的非特异性结合,通常建议控制在19-25个核苷酸之间。siRNA的GC含量对基因沉默效果至关重要,应控制在35-55%的范围内以获得最佳效果。靶序列的选择一般应针对目的基因的CDS序列,确保siRNA能够特异性结合并降解目标mRNA。为了提高实验的可靠性,通常...
原始的siRNA片段一旦进入人体,就会被细胞和组织中存在的大量核酸酶等给迅速降解掉,被降解后的siRNA就只能是一堆“垃圾”,不可能发挥出任何功效。 另外,即便没有降解的siRNA,也很容易被引起人体免疫系统识别吞噬,被内皮系统捕获,或者被随尿液等排出体外,同样无法到达靶基因位点发挥功效。 除了这两个问题,siRNA药物还有...
控制您的 siRNA 研究 | 经验证的 siRNA 对照品及匹配的一抗 设计RNAi 实验时控制细胞检测的变异性 描述存活素在肿瘤形成过程中的作用:siRNA 研究 siRNA 诱导的基因沉默的持续时间 确保RNAi 成功 增强siRNA 递送和长期基因沉默 siRNA 实验中的实验变异性和重复样本 siRNA...
siRNA 可以针对两大类疾病相关基因。一类由直接引起或驱动疾病的基因组成;沉默这些基因通过靶向其来源以治疗疾病。第二类由不一定驱动疾病、但可能抑制其它有益基因表达的基因组成;沉默这些抑制因子会提高可以改善疾病状态的基因的表达。siRNA 的巨大潜力在于它能够击中长期以来被认为是“不可成药”的目标,例如缺乏适合小...
siRNA靶向基因沉默的机制可以分为三个主要的步骤:siRNA的合成与运输、RISC复合物的组装以及基因沉默。 首先,siRNA的合成与运输是整个过程的起点。siRNA可以通过合成或者从外源性源头获取。无论是通过合成还是外源性获取,siRNA都需要通过细胞膜进入到细胞质中。通常情况下,siRNA会与载体结合形成复合物,通过细胞膜的内吞作...
📊 高效基因沉默:1 nM vs 10 nM 使用INTERFERin®递送1 nM siRNA就能达到具有选择性的高效基因沉默,而竞争产品需要至少10 nM siRNA才能达到50%的基因沉默。📈 惊人效果:10 pM siRNA 令人惊讶的是,使用10 pM siRNA依然能达到50%的沉默效率,证明了INTERFERin®的高效性。
RNA 干扰 (RNAi) 是一种进化上保守的基因表达沉默机制。化学合成的短干扰 RNA (siRNA) 可用于在培养的哺乳动物细胞中诱导沉默。
接下来,我们通过使用Western印迹检测蛋白质表达的变化来测试LNP介导的siRNA传递到神经元是否有效地沉默基因表达。我们首先测试了LNP传递的针对PTEN的siRNA,PTEN是锥体神经元中高表达的蛋白质。将含有PTEN siRNA(246 nmol/l)的LNP孵育于原代大鼠神经元培养物中48小时后,Western印迹显示出PTEN蛋白质的显著沉默(与对照相比,...