一、siRNA设计 小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA)是一段长度在20-25个核苷酸之间的RNA双链,其生物应用较多,目前主要用于干扰RNA,达到调节基因表达(敲减)的目的,其本质是siRNA和相应的mRNA特异性结合、降解,继而实现阻滞mRNA继续翻译的目的。 设计原则: 1.siRNA序列不宜过长,超过30nt易导致其与其
设计原则：siRNA序列的长度不宜过长，超过30个核苷酸可能导致与其他mRNA的非特异性结合，通常建议控制在19-25个核苷酸之间。siRNA的GC含量对基因沉默效果至关重要，应控制在35-55%的范围内以获得最佳效果。靶序列的选择一般应针对目的基因的CDS序列，确保siRNA能够特异性结合并降解目标mRNA。为了提高实验的可靠性，通常...
一、siRNA设计 小干扰RNA（siRNA）作为一段长度介于20至25个核苷酸的双链RNA，被广泛应用于生物学领域。其主要功能是干扰RNA，通过与特定mRNA的特异性结合和降解，从而实现对基因表达的调控（即基因敲减）。其核心机制在于阻止mRNA的进一步翻译。设计siRNA时，需要遵循以下原则：首先，要确保所选的siRNA序列与目标mRNA具...
siRNA 诱导的基因沉默的持续时间 确保RNAi 成功 增强siRNA 递送和长期基因沉默 siRNA 实验中的实验变异性和重复样本 siRNA 诱导的基因沉默 快速准确的基因沉默确认 | Silencer siRNA 和 TaqMan 基因表达检测试剂盒 生产siRNA 的五种方法 荧光标记您的 siRNA 以在活细胞中...
siRNA转染后一定时间内,需采用基本方法验证其转染效率,常见验证方式包括Western blot、RT-PCR、流式细胞术及ELISA等,对于含有荧光的质粒,也可采用荧光显微镜直接观察的方式来大致确定转染效率。一般来说,由于转染后的细胞常用于功能学实验,因此应该选用可以确定其转染效率的方法,本文主要分享在mRNA水平或蛋白水平上验证基...
这些逆转录病毒载体使用 H1 或 U6 聚合酶 III 启动子稳定表达 siRNA,即使在难以转染的细胞类型中也是如此。该技术扩展了 RNA 干扰研究,以应对导致疾病表型的基因表达的长期改变。 介绍:使用病毒使 siRNA 进入细胞 使用siRNA 诱导基因沉默有巨大的潜力,可用于识别和了解基因功能...
第一步,稍长片段的双链RNA(dsRNA)在细胞内被内切酶识别,并切割成小的双链RNA,也就是我们说的siRNA。 第二步,siRNA在一个名叫AGO2蛋白的帮助下,形成了一个沉默基因的复合物(RISC),并从双链拆分变成了单链RNA。其中一条单链(乘客链)被降解扔掉,另外一条单链(引导链)则会精准识别靶基因上能匹配的位点并与...
siRNA 可以针对两大类疾病相关基因。一类由直接引起或驱动疾病的基因组成；沉默这些基因通过靶向其来源以治疗疾病。第二类由不一定驱动疾病、但可能抑制其它有益基因表达的基因组成；沉默这些抑制因子会提高可以改善疾病状态的基因的表达。siRNA 的巨大潜力在于它能够击中长期以来被认为是“不可成药”的目标，例如缺乏适合小...
为解决常染色体显性遗传性骨发育不良 II 型(ADO2)缺乏有效靶向治疗的问题,桂林医学院第二附属医院的研究人员开展了利用 iPSCs 模型和 DMPC-SPIONs 递送系统进行 siRNA 介导基因沉默策略治疗 ADO2 的研究,结果显示该策略有效沉默突变基因,为 ADO2 治疗提供新途径17。
该研究创新地开发了一种基于胍基-siRNA纳米颗粒（Gu+-siRNA NPs）的递送系统，实现了跨物种、长距离的多基因同步沉默。这一突破性进展为农业生物技术领域带来了新的可能！在农业生物技术领域，RNA干扰（RNAi）技术虽然能够精确地调控基因表达，但一直面临着物种依赖性和局部作用范围的挑战。植物体内拥有木质部和筛管等...