siRNA转染后一定时间内,需采用基本方法验证其转染效率,常见验证方式包括Western blot、RT-PCR、流式细胞术及ELISA等,对于含有荧光的质粒,也可采用荧光显微镜直接观察的方式来大致确定转染效率。一般来说,由于转染后的细胞常用于功能学实验,因此应该选用可以确定其转染效率的方法一、mRNA水平——RT-PCR验证二、蛋白水平—...
使用INTERFERin®递送1 nM siRNA 就可以达到具有选择性的高效基因沉默,而竞争产品需要至少10 nM siRNA来达到50%的基因沉默 (Fig. 1). Fig. 1: INTERFERin®仅需要1 nM siRNA达到有效的基因沉默 更加令人惊叹的是, 使用10 pM siRNA 依然...
考虑到C12-200介导的递送的效力,我们假设更多的基因可以同时被合并的siRNA产物沉默。从治疗的角度来看,这可以实现更复杂的治疗方法,其中多个靶点的沉默可以获得增强的治疗效果。例如,这种策略可能特别适用于治疗病毒感染,如丙型肝炎病毒(HCV),在这种病毒感染中,快速进化的病毒基因组已被证明对单一序列的siRNA难以实现。...
根据猪肌肉斯钙素(STC)mRNA序列设计3对小干扰RNA(siRNA),阴性对照siRNA,转染PK15细胞后,通过荧光观察转染效率和基因表达效率,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及Western blot测定细胞内siRNA基因沉默后STC-1siRNA及蛋白的表达水平.结果表明:3个STC-1siRNA转染细胞后均有较高的荧光信号;STC-132细胞组STC-1mRNA和STC-1...
盖德化工网 > 盖德问答 > 这是我做siRNA转... 生物医学工程 这是我做siRNA转染转染六小时后换液照的照片,但是48小时后做WB基因沉默的效率很低,可以认为是序? 看图0评论 +关注 共1个回答 小傲娇,生产管理人员 2019-03-11回答 你的细胞状态好像不是很好 20 评论0 举报 ...
Polyplus通用型DNA/siRNA转染试剂的应用 jetPRIME®是Polyplus公司合成的#新型#阳离子聚合物转染试剂。其可显著提高不同细胞系的#转染效率,实现#基因编辑 和#基因沉默,且适用于DNA和siRNA共转染。但不适用于悬浮细胞和植物细胞转染。@DOU+小助手 1 1 收藏 ...
本发明提供了抑制内体胞内循环增加sirna从内体内释放、从而提高sirna基因沉默效率的思路和方法。sirna分子临床转化存在的最大问题是生物有效性有限。无论采用纳米载体给药系统,还是偶联物结构给药系统,目前制约sirna分子生物有效性的最大瓶颈是进入细胞内体中的sirna分子,仅有<0.01%的分子逃逸出来,进入胞浆中的基因沉默...
基因沉默实验:siRNA转染效率验证 siRNA转染后一定时间内,需采用基本方法验证其转染效率,常见验证方式包括Western blot、RT-PCR、流式细胞术及ELISA等,对于含有荧光的质粒,也可采用荧光显微镜直接观察的方式来大致确定转染效率。一般来说,由于转染后的细胞常用于功能学实验,因此应该选用可以确定其转染效率的方法,本文主要...
siRNA基因沉默根据猪肌肉斯钙素(STC)mRNA序列设计3对小干扰RNA(siRNA),阴性对照siRNA,转染PK15细胞后,通过荧光观察转染效率和基因表达效率,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及Western blot测定细胞内siRNA基因沉默后STC-1siRNA及蛋白的表达水平.结果表明:3个STC-1siRNA转染细胞后均有较高的荧光信号;STC-132细胞组STC-1...