一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
理想情况下,纯蛋白在 SDS PAGE 凝胶上应呈现单一的条带。若出现多条条带,则表明蛋白样品存在杂质或降解产物。一般认为,在考马斯亮蓝染色的凝胶上,若目标蛋白条带以外的杂蛋白条带强度低于目标蛋白条带强度的 5%,可初步认为蛋白纯度较高。 2. 条带宽度与形状: 纯蛋白条带应具有较窄且均一的宽度,边缘整齐。如...
一般认为是 ug 量级.以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象.1.跟你的样品纯度有关.如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少.如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你... 分析总结。 一般对于sdspage上样量都是说上样多少ul我想问下sdspage能检测到的蛋白...
首先做BCA定量；常用蛋白质量20-30ug，这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积；然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算，最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语： polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE） ，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白...
广告 SDS-PAGE凝胶电泳蛋白上样的标准是什么 这要看你要的分辨率了,PAGE的分辨率是较高的,建议你蛋白的分子量小点 如果你分辨率很高,确实大了 SDS-PAGE凝胶电泳蛋白上样的标准是什么 这要看你要的分辨率了,PAGE的分辨率是较高的,建议你蛋白的分子量小点 如果你分辨率很高,确实大了 老中医说:山楂和这个是“天生...
然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算，最后用双蒸水补齐。当然，也有大神不做蛋白定量...
没什么特别要注意的吧，就是点样不容易，点样槽不容易看出来，要仔细辨认。再来就是点样时要注意手上的力道，不能打太多溢出来，相邻的几个样品就被污染了，整个胶板也有可能要重做。也不能提前松手，要不然移液枪会吸到胶，一管样品就报废了 好像就这么多吧，也不是什么太难的操作 ...
5×SDS-PAGE Loading Buffer配制方法 组份浓度: 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇 配制量: 5mL 配制方法: 1.量取下列试剂,置于10mL塑料离心管中。 1M Tris-HCl 1.25mL SDS 0.5g BPB 25mg 甘油2.5mL 2.加入去离子水溶解后定容至5mL...
浓度没有硬性要求，但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低，可进行冻干，把体积浓缩一下测完蛋白浓度后上样。
蛋白上样量的选择 要根据具体情况决定,对于考马斯亮蓝染色,如果样品为菌体蛋白样品,有至少50条以上的条带要显出来,需要上样量在15 μg左右即可,如果蛋白条带少于6条,如蛋白Marker或纯化阶段后期的蛋白样品,上样量可减少至2 μg即可显出清晰的条带。【简化...