一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
不过你上多大的体积,其实还是要看你上样的蛋白量,不要太多,那样会把泳道撑开,太少反正看不清蛋白!考染可以多上些蛋白, 冼亮淀粉酶 多大尺寸的梳子齿决定可以上样多大的样品体积。另外,你可以自己做胶或别人做胶跑之前拔掉梳子之后,加水看看能加多少。 enzyming 你可以加到100微升!!!不用担心,多加几次。
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。 聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。 作...
一般认为是 ug 量级.以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象.1.跟你的样品纯度有关.如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少.如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你... 分析总结。 一般对于sdspage上样量都是说上样多少ul我想问下sdspage能检测到的蛋白...
首先做BCA定量；常用蛋白质量20-30ug，这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积；然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算，最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语： polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE） ，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白...
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。 聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。 作...
A、B、C、D：SDS-PAGE凝胶浓度分别为8%、10%、12%、15%；从左至右彩色预染蛋白Marker的上样量...
没什么特别要注意的吧，就是点样不容易，点样槽不容易看出来，要仔细辨认。再来就是点样时要注意手上的力道，不能打太多溢出来，相邻的几个样品就被污染了，整个胶板也有可能要重做。也不能提前松手，要不然移液枪会吸到胶，一管样品就报废了 好像就这么多吧，也不是什么太难的操作 ...
除了BCA方法，也可以粗略地通过超微紫外分光光度计测出浓度。以此粗略估计上样量。