一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
一般上样10-15ul 比较好。。我就是这么做的 wlt728 上样体积的话,5-20μl都可以,只要你的样品不漂出来污染别的泳道就可以!不过你上多大的体积,其实还是要看你上样的蛋白量,不要太多,那样会把泳道撑开,太少反正看不清蛋白!考染可以多上些蛋白, 冼亮淀粉酶 多大尺寸的梳子齿决定可以上样多大的样品体积。
一般认为是 ug 量级.以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象.1.跟你的样品纯度有关.如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少.如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你... 分析总结。 一般对于sdspage上样量都是说上样多少ul我想问下sdspage能检测到的蛋白...
浓度没有硬性要求,但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低,可进行冻干,把体积浓缩一下测完蛋白浓度后上样。常规样品都不用去管PH值,因为上样缓冲液中含有TRIS-HCl,缓冲力比较强,可以中和你样品PH.除非你样品中盐离子(弱酸弱碱盐)浓度太高.就得处理一...
sds--page电泳时蛋白样品的浓度多大合适呢 浓度没有硬性要求,但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低,可进行冻干,把体积浓缩一下测... 危险品sds 专业机构 2天出证 全程无需操心 危险品sds SDS化学品安全说明书认准DGRTTS,价格优惠.2天快速出证,全程无需操心....
15%的胶应该是没问题的,跑的时间长一些,距离长一些就能跑开。上样量得看你蛋白的表达量,一般15-30μg就应该没有问题,不过选用β-actin做对照,建议用另一块12%的胶跑β-actin,这样可以使目的蛋白和对照条带宽度大概一致。
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白...
要根据具体情况决定,对于考马斯亮蓝染色,如果样品为菌体蛋白样品,有至少50条以上的条带要显出来,需要上样量在15 μg左右即可,如果蛋白条带少于6条,如蛋白Marker或纯化阶段后期的蛋白样品,上样量可减少至2 μg即可显出清晰的条带。【简化成大肠杆菌上样,大...
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