一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白...
建议你蛋白的分子量小点 如果你分辨率很高,确实大了 SDS-PAGE凝胶电泳蛋白上样的标准是什么 这要看你要的分辨率了,PAGE的分辨率是较高的,建议你蛋白的分子量小点 如果你分辨率很高,确实大了 老中医说:山楂和这个是“天生一对”快速瘦,一不小心瘦到90斤 老中医说:山楂和这个是“天生一对”快速瘦,一不小心瘦到...
B、C、D:SDS-PAGE凝胶浓度分别为8%、10%、12%、15%;从左至右彩色预染蛋白Marker的上样量分别为1...
染色液请倒入专用的回收容器内。以自来水小心地淋洗凝胶冲去剩余染料,然后倒入适量的脱色液,微波加热至刚沸腾后于染色摇床上摇动约10 min,倒掉脱色液,此时凝胶的蛋白条带即可看清。重复以上脱色步骤一次,即可看清电泳条带。扫描凝胶蛋白条带需要完全脱掉背景颜色,这...
SDS-PAGE凝胶电泳测蛋白质分子量 一、药剂准备 a、SDS-PAGE凝胶配制试剂: 1、30%Acr-Bis(29:1) 100ml 2、1M Tris-HCL,PH8.8 100 ml 3、10%SDS5ml 4、Ammonium persulfate (过硫酸铵)0.5克 先配制成10%的溶液以备用,如0.0625g/625ul无菌水。可可 5、TEMED 0.5 ml 6、1M Tris-HCL,PH6.8 15ml b、...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合成的三维网状结构。SDS-PAGE一般采用不连续凝胶系统,即含有不同孔径的两层凝胶...
电压过高,导致凝胶变型,局部浓度变化,使得蛋白跑不下去。建议加强电泳时的冷却。可以放在4度冰柜里面跑 结果一 题目 请帮我分析下SDS-PAGE电泳图我用的4倍上样缓冲液,上样量大概45ug。请问那个最上面跟泡似的是怎么回事啊?目的条带250kda,130kda都不是很清楚。我用的5%浓缩胶,15%分离胶 答案 电压过高,导致...
1) 将电极导线接至电源,黑的接于负极,红的接于正极 pH8.3 时,与 SDS 结合的蛋白质荷负电,它们将向正极迁移。 2) 压缩胶部分每块胶以 8mA 电流(恒流) 电泳。若两块胶在一个电泳槽内同时进行电泳,则以 16mA 电流进行电泳。在压缩胶/分离胶界面处,蛋白质样品将压缩...