电泳缓冲液 电泳槽系统 蛋白免疫印迹western blot 蛋白凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种在进行下游检测或分析前分离蛋白混合物的简单方法。我们提供高效的蛋白凝胶电泳方案,涵盖蛋白分析实验所需的蛋白预制胶、电泳槽、手灌胶系统、染料、蛋白Marker、电泳缓冲...
SDS-PAGE(SodiumDodecylSulfatePolyacrylamideGelElectrophoresis)电泳是一种用于分离和检测蛋白质的电泳技术。原理 通过在电场的作用下,带电蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移,依据蛋白质分子量大小进行分离。SDS将蛋白质完全变性,使其成为单一的线性分子,并赋予每个蛋白质分子相同的电荷量,从而使蛋白质按分子量大小分离。...
Tris-HCl——稳定电泳过程中的pH。pH对电泳有着至关重要的影响。 十二烷基硫酸钠(SDS)——能破坏蛋白分子的二、三级结构,使分子去折叠,让所有蛋白质分子均匀地带上负电荷,在施加电压的情况下,所有的蛋白质都向凝胶的正极迁移,仅根据蛋白的分子量大小不同而分离,与蛋白的带电量和结构形状无关。在凝胶中也存在SD...
1) 将电极导线接至电源,黑的接于负极,红的接于正极 pH8.3 时,与 SDS 结合的蛋白质荷负电,它们将向正极迁移。 2) 压缩胶部分每块胶以 8mA 电流(恒流) 电泳。若两块胶在一个电泳槽内同时进行电泳,则以 16mA 电流进行电泳。在压缩胶/分离胶界面处,蛋白质样品将压缩...
这种电泳方法称为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS—PAGE)。由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE后,就只出现...
基于上述原因,蛋白质-SDS复合物在凝胶电泳中的迁移率,不再受蛋白质原有电荷和形状的影响,而只与椭圆棒的长度有关,也就是蛋白质Mr的函数。 二.试剂器材 30%凝胶贮液(100mL):称取试剂Acr29.2g和Bis0.8g置于100mL烧杯中,向烧杯中加入约60mL双蒸水,充分搅拌溶解后加双蒸水定容至100mL,置于棕色瓶内4℃贮存,...
聚丙烯酰胺凝胶是一种网状结构,具有分子筛效应,可以根据蛋白质和核酸分子的电荷、形状和大小来分离。包括非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(native-PAGE)和变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(蛋白质变性剂通常为SDS,核酸变性剂通常为尿素、甲酰胺等)。 SDS-PAGE,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝...
蛋白质-SDS复合物的流体力学和光学性质表明,它们在水溶液中的形状,近似于雪茄烟形的长椭圆棒,不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样,约为1.8nm,而长轴则随蛋白质的Mr成正比的变化。基于上述原因,蛋白质-SDS复合物在凝胶电泳中的迁移率,不再受蛋白质原有电荷和形状的影响,而只与椭圆棒的长度有关,也就是...
SDS-PAGE电泳是一种常用的蛋白质分离技术,依赖于蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的大小差异来分离。以下是SDS-PAGE电泳实验的详细步骤流程: 实验材料与试剂 蛋白样品 SDS-PAGE凝胶: 分离胶(Resolving gel)和浓缩胶(Stacking gel) SDS-PAGE缓冲液: 凝胶制备缓冲液、跑胶缓冲液(Running buffer) ...
SDS-PAGE 蛋白电泳分析 一、 目的 掌握 SDS-PAGE 电泳原理与方法 二、 电泳原理 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称 Acr) 和交联剂 N,N’—亚甲基双丙烯酰胺(简称 Bis)在催化剂作用下,聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的...